如何用transwell进行细胞迁移实验 Transwell法的步骤:先把小室2113擦干净后在超净工作台照紫外过5261夜。如新的小室4102省略此步。下一步将小室倒1653扣并小室的底部外侧滴加0.1%(还是1%记不清了)的明胶室温放置20-30分钟。这是将细胞消化下来,调浓度。拿出24孔板加600ml的含有刺激因子的培养基。小室上还未干的明胶甩掉,加细胞放入24孔板里。放入细胞培养箱培养4-6小室。拿出小室甩掉里边的培养基。小心擦尽小室里边的细胞(不能碰外边)。将小室放入装有600ml结晶紫的24孔板染色1小时。移到空的24孔板后即可在显微镜下观察了。细胞迁移实验步骤(Neuroprobe的使用方法)1.膜预处理将48.5ml H2O+1.5ml 醋酸+150μL 鼠尾胶原置于50ml的离心管。在膜的粗糙面用铅笔做标记,放入上述溶液中4度过夜。实验前将膜取出,放入装有PBS的培养皿中漂洗一遍,再用饥饿培养基洗一遍,吸去培养基后加入新的饥饿培养基,放入37度培养箱中。2.处理细胞将细胞消化,调浓度1×105个/ml,细胞迁移装置下层加入166μl含有刺激因子的饥饿培养基。小心铺好膜(粗面朝下),装好塑料垫,固定上层装置。上层加入100μl细胞悬液,迁移4-6h。3.固定小心将膜取下来,在用PBS弄湿的滤纸上挂掉光滑面的细胞,在新的滤纸。
真菌与细菌在分裂时分别是通过怎样的方式变为两个细胞的? 真菌,真核生物,①营养物质的积蓄及各种酶类合成,②染色体(DNA)复制,③有丝分裂,细胞核分裂成两个,迁移到两端,④两个细胞核之间形成隔阂,成为两个细胞,当然也。
细胞迁移侵袭实验操作步骤(Transwell) 去文库,查看完整内容>;内容来自用户:雷正芝迁移实验(cell migration assay)实验介绍细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔,将研究的细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜,就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。实验步骤:1材料准备:可拍照显微镜,Transwell小室,孔径8μm,没包被胶的(Coster和Corning公司的也较常用),Transwell迁移实验的细胞培养板24孔板。细胞培养板应当与购买的Transwell小室相配套,BD公司的Matrigel,无血清DMEM,(1%胎牛血清)DMEM和1640培养基,DMEM完全培养基,1640完全培养基(也可加到20%血清),无菌PBS,棉签,胰酶,4%多聚甲醛固定液或者甲醇,结晶紫染液(0.1%(g/ml)PBS结晶紫)2步骤和流程2.1基质胶铺板:用BD公司的Matrigel 1:8(根据细胞产生mmp的量来决定)稀释,包被Transwell小室底部膜的上室面,置37℃30min使Matrigel聚合成凝胶。使用前进行基底膜水化。2.2制备细胞悬液①制备细胞悬液前可先让细胞撤血清饥饿12-24h,。