酶标仪的正确认识使用及校准 去文库,查看完整内容>;内容来自用户:银屏free酶标仪的正确认识、使用及校准贵州省临床检验中心吴娴正确认识、使用酶标仪ELISA的基本过程涉及到加样、温育、洗板和显色、比色测定等关键环节。在酶标仪未普及以前,比色测定通常使用肉眼看是否显色来判断结果,结果判断欠客观。随着医院和血站实验室条件的改善,加之,卫生部明确要求血站实验室在做ELISA测定时必须使用仪器判读结果,因此酶标仪的正确使用及校准是保持酶标仪对微孔板比色有足够的准确度和精密度,从而为实验室提供准确、可靠、客观的结果(定性项目评价)。对已有酶标仪的实验室又如何去正确使用呢?要正确使用酶标仪就必须对酶标仪的一些性能指标(测定波长、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度控制、定性和定量测定软件功能等方面)有一定的了解。(一)测定波长一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间就可以满足ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP),底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD)。OPD在过氧化氢溶液存在下,经HRP作用,分别氧化为2,2′-二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5.0左右时,DAB在450nm波长处。
ELISA TMB显色液怎么配制?我配的怎么一混合就浑浊了 配方一:底物显色A液:醋酸钠13.6g,柠檬酸1.6g,30%双氧水0.3ml,蒸馏水加至500ml.底物显色B液:乙二胺四乙酸二钠0.2g,柠檬酸0.95g,甘油 50ml,取0.15g TMB溶于3mlDMSO中,蒸馏。
做ELISA时要用到TMB显色液,怎么配制?效果怎么样?有人试过没有?配方一:底物显色A液:醋酸钠13.6g,柠檬酸1.6g,30%双氧水0.3ml,蒸馏水加至500ml.底物显色B液:乙二胺四乙酸二钠。