高效液相是什么原理？ 高效液相的原理：液相色谱是一类分离与分析技术，其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中．为了区分各种方法，根据固定相的形式产生了各自的命名，如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。液相色谱是一类分离与分析技术，其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中．为了区分各种方法，根据固定相的形式产生了各自的命名，如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。分离后的样品是被分级收集后再进行分析的，使得经典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢，而且操作也比较复杂。直到20世纪60年代．发展出粒度小于10μm的高效固定相，并使用了高压输液泵和自动记录的检测器，克服了经典液相色谱的缺点，发展成高效液相色谱，也称为高压液相色谱。扩展资料：高效液相统称为高柱效、高压力、高效率的液相色谱。根据液相色谱原理，对物质进行分离。其原理可采用分配色谱，也可采用吸附色谱等等，其大体结构为：泵（用来输送流动相，即溶剂/洗脱液，A相一般为水溶性。
高效液相色谱法定性定量重复性为什么要以被分离组分的保留时间之差和峰面积比来表示 高效液相色谱法定性定量重复性要以被分离组分的保留时间之差和峰面积比来表示，因为保留时间是由被分离的物质性质决定的，峰面积大小由被分离物质的量决定的，峰面积越大，。
保留值受哪些因素影响？ 保留值受溶质分子结构、烷基键合固定相的特性、流动相性质影响。1、溶质分子结构在反相键合相色谱法中，溶质的分离以它们的疏水结构差异为依据的，溶质的极性越弱，疏水性也强，保留值越大。根据疏溶剂理论，溶质的保636f7079e799bee5baa631333431366362留值与其分子中非极性部分的总表面积有关，其与烷基键合固定相结出的面积愈大，保留值越大。2、烷基键合固定相的特性烷基键合固定相的作用在于提供非极性作用表面，因此键合到硅胶表面的烷基数量就决定着溶质容量因子的大小。烷基的疏水特性随碳链的加长而增加，溶质的保留值也随着烷基碳链长度的增加而增人。随着烷基碳链的增长，增加了键合相的非极性作用的表面积，其不仅影响溶质的保留值，还影响色谱柱的选择性，即随烷基碳链的加长其对溶质分离的选择性也增大。3、流动相性质流动相的表面张力愈大，介电常数愈大，其极性越强，此时溶质与烷基键合相的缔合能力越强，流动相的洗脱强度弱，导致溶质的保留值越大。扩展资料保留值主要由固定相比表面积、键合相种类和浓度决定。保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增大，对于非极性化合物通常遵循以下规则：(弱)非键合硅胶《氰基(TMS)苯基≈C18(强)。。
