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蛋白质调节作用实例 1、何谓蛋白质变性?举例说明蛋白质变性作用的应用。

2021-04-26知识2

蛋白质有那些功能,举例说明 00:00 00:00 100%用户鉴权失败,请先注册成为云用户 云

沉淀蛋白质的几种方法及应用实例 1.盐析法—多用于各种蛋白质和酶的分离纯化在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏蛋白质的胶体稳定性而使其析出,这种方法称为盐析.常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等.各种蛋白质盐析时所需的盐浓度及pH不同,故可用于对混和蛋白质组分的分离.例如用半饱和的硫酸铵来沉淀出血清中的球蛋白,饱和硫酸铵可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出来,盐析沉淀的蛋白质,经透析除盐,仍保证蛋白质的活性.调节蛋白质溶液的pH至等电点后,再用盐析法则蛋白质沉淀的效果更好.盐析法分为两类,第一类叫Ks分段盐析法,在一定PH和温度下通过改变离子强度实现,用于早期的粗提液;第二种叫b分段盐析法,在一定离子强度下通过改变PH和温度来实现,用于后期进一步分离纯化和结晶.影响盐析的因素包括:蛋白质浓度、离子强度和类型、PH值、温度等.针对温度这一条,需要强调:在低离子强度或纯水中,蛋白质溶解度在一定范围内随温度增加而增加.但在高浓度下,蛋白质、酶和多肽类物质的溶解度随温度上升而下降.在一般情况下,蛋白质对盐析温度无特殊要求,可在室温下进行,只有某些对温度比较敏感的酶要求在0-4℃进行.使用硫酸铵沉淀蛋白需要注意:硫酸铵中常含有少量的重金属离子,对蛋白质巯基有敏感作用,。

常用蛋白质沉淀方法有哪些?有哪些应用实例? 通用型蛋白沉淀试剂Universal Protein Sediment Reagent产品说明:通过本通用蛋白质沉淀试剂,可以将浓度为1 ng/ml的蛋白质溶液浓缩为小体积。在浓缩的过程中,可以去除绝大部分去污剂、变性剂和其它实验室常用试剂。如果按照实验步骤正确操作,蛋白质的回收效率接近100%,回收的蛋白质可以用于电泳、蛋白定量、纯化等,但是蛋白质的活性会丧失,整个操作可以在1 h内完成,本试剂可以使用100次。Store:18~25℃。产品特点:1、可以浓缩低至1 ng/ml的蛋白质溶液,浓缩样品体积可以减少到50 ul;2、可以去除非蛋白的去污试剂、还原试剂、螯合试剂、Tris、糖和尿素、硫脲、盐酸胍、载体两性电解质等杂质;3、蛋白质的回收效率接近100%;4、回收的蛋白质可以用BCA法(SK3021、SK3051、SK3061)或Bradford法(SK3031、SK3041)或Lowry法((SK4031、SK4051)对蛋白质进行定量,以减少干扰物质对蛋白质定量准确性的影响。编号 包装 价格 品牌BSP012 100 preps 240 生工三氯醋酸浓缩试剂盒TCA Protein Precipitation Kit产品说明:三氯醋酸蛋白浓缩沉淀试剂盒是利用三氯醋酸(Trichloroacetic Acid,TCA)沉淀蛋白质,从而达到浓缩蛋白质浓度的目的,即从低浓度。

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