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红细胞的洗涤不沉淀

2021-04-26知识8

在蛋白质的提取和分离中,对于样品的处理过程的解析正确的是 A

红细胞破碎物沉淀是我们所要分离的血红蛋白溶液吗他是我们需要的吗? ① 红细胞的洗涤2113洗涤红细胞的目的是去除杂5261蛋白,采集的血样要及4102时采用低速短时间离心分离红细胞,然后用胶头1653吸管吸出上层透明的黄色血浆,将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯,再加入五倍体积的生理盐水,缓慢搅拌10min,低速短时间离心,如此重复洗涤三次,直至上清液中没有黄色,表明红细胞已洗涤干净。②血红蛋白的释放在蒸馏水和甲苯作用下,红细胞破裂释放出血红蛋白。注:加入蒸馏水后红细胞液体积与原血液体积要相同。加入甲苯的目的是溶解细胞膜,有利于血红蛋白的释放和分离。2.粗分离①分离血红蛋白溶液将搅拌好的混合溶液离心后,试管中的溶液分为4层。第一层为无色透明的甲苯层,第2层为白色薄层固体,是脂溶性物质的沉淀层,第3层是红色透明液体,这是血红蛋白的水溶液,第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。将试管中的液体用滤纸过滤,除去之溶性沉淀层,于分液漏斗中静置片刻后,分出下层的红色透明液体。②透析取1mL的血红蛋白溶液装入透析袋中,将透析袋放入盛有300mL的物质的量的浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液中,透析12h。透析可以去除样品中分子量较小的杂质,或用于更换样品的缓冲液。

血红蛋白的提取与分离中,红细胞洗涤采用低速离心的原因是防止白细胞沉淀,但为什么要防止白细胞沉淀呢?

#红细胞的洗涤不沉淀

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