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成纤维细胞接种密度 用6孔板养细胞最初放下去的细胞浓度最好是多少?加多少培养液合适?成纤维细胞的话几天能长满?

2021-04-25知识2

如何养293、293T系列的细胞? 将细胞培养瓶竖立放置,吸走培养基,如果培养基中的脱落细胞较多,说明细胞现在很容易脱落,只要加入1ml的PBS+EDTA(0.02%),来回轻微晃动培养瓶直到细胞完全脱落,加入10mlMEM,混匀,不能吹打,分装2瓶。如果细胞没长满就脱落,则只需加入5mlMEM,不分装。如果培养瓶中的细胞贴壁较牢固,培养基上清没有细胞脱落碎片,且细胞长满达到80%以上,吸走培养基,加入5ml的PBS+EDTA(0.02%),迅速轻微晃动,竖立培养瓶,吸走,加入1ml0.05%胰酶,37度消化不超过3min。扩展资料:注意事项:1、尽量用早期的细胞,传代太多状态不好,产毒也不好,贴壁困难。2、塑料的瓶子,DMEM+10%的小牛血清即可,要求并不高,ATCC上有详细的培养方法。3、主要是传代,胰酶消化点到即止,不能和其它成纤维细胞一样。4、细胞代数越高生长越快,同时性状和原代差别也更大。一般2-3天传代一次比较合适。5、传代时细胞密度在80%左右比较好,如果超过90%融合再传会影响细胞状态。参考资料来源:-293细胞

谁能说一下原代培养和传代培养的区别 原代培养 通过组织块直接长出单层细胞或用酶或机械方法将组织分散成单个细胞开始培养,在首次传代前的培养可认为是原代培养.原代培养最大的优点是,组织和细胞刚刚离体,生物性状尚未发生很大变化,在一定程度上能反映体内状态.特别是在细胞培养会合时,原代培养的某些特殊功能表达尤为强烈.在这样的培养阶段能更好地显示与亲体组织紧密结合的形态学特征.在供体来源充分、生物学条件稳定的情况下,采用原代培养做各种实验,如药物测试、细胞分化等,效果很好.但应注意,原代培养组织是由多种细胞成分组成的,比较复杂.即使全为同一类型的细胞,如上皮细胞或成纤维细胞,也仍具有异质性,在分析细胞生物学特性时比较困难.其次,由于供体的个体差异及其他一些原因,细胞群生长效果有时也不一致.原代培养也是建立各种细胞系(株)必经的阶段.假如原代培养能够维持几小时甚至更长,即可进行进一步筛选.有的细胞具有继续增殖能力,有的细胞类型只是存活而不增殖,而另外一些细胞只是在特殊条件下应用而不存活,因而细胞类型的分布将会改变.在单层培养的情况下,瓶底全部铺满细胞,达到会合以后,对密度有依赖性的细胞则逐渐减少生长,而失去密度依赖敏感性的细胞则生长增加,天然或自发转化的细胞则过度。

试述动物细胞固定化培养的原理和方法。1.固定化培养方法 在动物细胞培养中,培养细胞的目的不仅仅要求催化活细胞培养中,培养细胞的目的不仅仅要求催化活力,更重要的是利用。

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