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免疫组化试验方法 免疫组化的操作步骤

2021-04-25知识4

免疫组化的实验步骤有出入怎么办 把自己的实验理一遍;找出“出入”的地方,然后找人一起看看实验操作什么的。找到问题之后,以后多加注意,关键是形成自己操作的好习惯,还有记录实验操作的好习惯哦~

免疫组化的操作步骤 一 免疫组化(SP法)操作步骤62616964757a686964616fe4b893e5b19e313333396666651.切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3.为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4.缓冲液洗 5min/2 次。5.滴加 Ultra V Block,在室温下孵育 5 分钟以封闭非特异性的背景染色。(注:孵育不要超过 10 分钟,否则会导致特异性染色降低。如果一抗的稀释液中含有 5-10%正常羊血清,这一步可以省略。6.缓冲液洗 5min/2 次。7.滴加一抗工作液 37 ℃孵育 1-2 小时。(具体孵育时间和温度由试验者最终决定)8.缓冲液洗 5min/2 次。9.滴加 Primary Antibody Enhancer(增强子),在室温下孵育 20 分钟。10.缓冲液洗 5min/2 次。11.滴加 HRP Polymer(酶标二抗),在室温下孵育 30 分钟。(注:HRP Polymer 对光敏感,应避免不必要的光暴露并储存在不透明的小瓶中。12.缓冲液洗 5min/2 次。13.向 1ml DAB Plus Substrate(或 AEC Plus Substrate)中滴加 1-2 滴 DAB Plus Chromogen(或 AEC Plus Chromogen),混匀后滴加到切片上,孵育 3-15 分钟。(具体时间由染色深浅决定。。

免疫组化实验 这谁到处贴的实验步骤啊真是害死个人。这只是发贴这个人自己实验室用的两种不同方法罢了,不是正规的分类。两个方法用的试剂是不同厂商生产的罢了,前一个是试剂盒,后一个可能是自己配的,原理和步骤都差不多。LP是厂商取的产品名,没有解释什么意思,跟内容也没有关系,就好像诺基亚3260为什么叫3260不叫阿诺三号对使用者来说没有关系,只有产品功能有关系。这个试剂盒我们也用,不错。产品信息给链接了。

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