细胞迁移和侵袭实验技术 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：jemo1991肿瘤细胞运动实验技术肿瘤细胞生物学实验室张宁PI组肿瘤细胞运动体内实验：皮下移植瘤模型原位移植瘤模型体外实验Text划痕实验inhere侵袭实验肿瘤细胞运动常用研究方法趋化运动划痕实验（伤口愈合实验，ScratchAssay）实验原理细胞划痕法是测定了肿瘤细胞的运动特性的方法之一。在体外培养的单层细胞上，划痕致伤，然后在加入药物等实验条件下观察其对肿瘤细胞迁移的影响。操作步骤1．先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀的划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横32313133353236313431303231363533e78988e69d8331333433623830穿过孔。每孔至少穿过3条线。操作步骤2.在孔中加入约5×105个细胞，具体数量因细胞种类不同而不同，接种原则为过夜后融合率达到100%；3.用10mltip枪头用力均匀地在培养皿中划痕，PBS洗涤2次，去除划下的细胞，加入无血清培养基。操作步骤4．放入37℃5%CO2培养箱培养。每3h测量一次细胞运动的距离，拍照(具体时间依实验需要而定)。操作步骤5.数据处理：每个时间点的距离长度-0时距离=每个时间长度细胞整体迁移的距离，求出均数和标准差，时间为横轴，迁移距离为纵轴（单位mm）作图，并比较。
集落形成和细胞增殖实验有什么区别 细胞集落形成实验2113非整倍体无限细胞5261系和癌细胞株中，仍4102然存在不同细胞亚群，它们的1653功能和生长特点有些差异，其中有些亚群细胞对培养环境有较大的适应性和具有较强的独立生存能力，细胞集落率高。纯化细胞群来自一个共同的祖细胞，细胞遗传性状、生物学特性相似，利于实验研究。原代培养细胞和二倍体有限细胞系，细胞集落率很低。细胞集落化培养之前，应先测定细胞集落形成率，以了解细胞在极低密度条件下的生长能力。目前认为仅有肿瘤干细胞具有形成集落的能力，集落抑制率常用于抗癌药物敏感试验、肿瘤放射生物学试验。集落抑制率=（1-（实验组集落形成率/对照组集落形成率））×100%（一）原理细胞集落形成率 单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞，大小在0.3-1.0mm 之间。集落形成率表示细胞独立生存能力。常用方法有平板集落形成试验、软琼脂集落形成试验。（二）实验用品1.材料：Hela细胞。2.器材：（直径 60mm）培养皿、细胞记数板、烧杯、吸管、离心机、离心管、废液瓶、倒置显微镜、二氧化碳培养箱、超净工作台、水浴锅。3.试剂：Giemsa染液、0.25%胰蛋白酶消化液、血清细胞。
