简述气相色谱中归一化法和内标法定量的优缺点,它们各适用于什么情况 色谱分析常用的定量方法:归一化法、内标法和内加(增量)内标法、外标法。1、面积归一化法优点是简便、准确,当操作条件变化时对结果影响较小,宜于分析多组分试样中各组。
一般情况是2%以下即可,峰面积较小者可以酌情降低要求。关于药品测定中液相色谱使用要求如下:根据中国药典2010版二部附录V D 高效液相色谱法项下,系统适用性试验项下重复性的描述:用于评价连续进样中,色谱系统响应值的重复性能。采用外标法时,通常取各品种项下的对照品溶液,连续进样5次,除另有规定外,其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0%;采用内标法时,通常配制相当于80%、100%和120%的对照品溶液,加人规定量的内标溶液,配成3种不同浓度的溶液,分别至少进样2次,计算平均校正因子。其相对标准偏差应不大于2.0%。根据测定法项下加校正因子的主成分自身对照中的描述:通常含量低于0.5%的杂质,峰面积的相对标准偏差(R S D)应小于1 0%;含量在0.5%~2%杂质,峰面积的R S D应小于5%;含量大于2%的杂质,峰面积的RSD应小于2%〕。高效液相色谱做2个平行相结果的相对偏差控制在多少
什么是外标法? 这是色谱定量分析中较早使用的一种方法,应用比较广泛.此方法的中心内容是需要用预测组分的标准物(或称对照样品)作出峰高或峰面积对含量(重量或浓度)的校正曲线.校正曲线通常是线性的,并且外推通过原点.绘制校正曲线,可将标准物配成数分不同浓度的溶液,然后取不同的量分别进行定量分析(每次分析都在完全相同的条件下),将色谱图上测得的峰高或峰面积对含量作图,可得一条外推通过原点的直线.若直线不通过原点或是非线性的,则认为操作中有较大误差.对未知样品进行定量分析,只要将预测组分至于与标准物完全相同的操作条件下,将得到的峰面积或峰高用插入法与标准物的校正曲线作对照,就可得到组分的百分含量.当然,也可通过下列公式进行计算:Pi%kiAi(1)Pi%kihi(2)Pi%kih'i(2)峰高或峰面积 式中,Pi-组分i的含量;Ai-组分i的峰面积;hi、h'i-组分i的峰高;ki-组分i的定量校正因子,等于单位峰面积或单位峰高时组分i的含量.即为校正曲线的斜率.外标法适用于工厂中的常规分析,它用于痕量组分的分析也能得到满意的结果.这个方法的精确度,在很大程度上取决于操作条件的控制.样品分析的操作条件,必须严格控制于绘制校正曲线时的条件.当峰高对操作条件的敏感性以及对拖尾峰、柱子。