蛋白质的分离方法有哪些？它们各依据蛋白质的什么性质或特点？ （一）水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂，通常用量是原材料体积的1-5倍，提取时需要均匀的搅拌，以利于蛋白质的溶解.提取的温度要视有效成份性质而定.一方面，多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大，因此，温度高利于溶解，缩短提取时间.但另一方面，温度升高会使蛋白质变性失活，因此，基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温（5度以下）操作.为了避免蛋白质提以过程中的降解，可加入蛋白水解酶抑制剂（如二异丙基氟磷酸，碘乙酸等）.下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择.1、pH值蛋白质，酶是具有等电点的两性电解质，提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH范围内.用稀酸或稀碱提取时，应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化，从而导致蛋白质构象的不可逆变化，一般来说，碱性蛋白质用偏酸性的提取液提取，而酸性蛋白质用偏碱性的提取液.2、盐浓度稀浓度可促进蛋白质的溶，称为盐溶作用.同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合，具有保护蛋白质不易变性的优点，因此在提取液中加入少量NaCl等中性盐，一般以0.15摩尔.升浓度为宜.缓冲液常采用0.02-0.05M磷酸盐和碳酸盐等渗盐溶液.（二）有机溶剂提取法一些和。
提取苷类化合物时应注意什么问题 提2113取香豆素时注意事项(一)水蒸汽5261蒸馏法小分4102子的香豆素类因具有挥1653发性；可采用水蒸汽蒸馏法进行提取。(二)碱溶酸沉法由于香豆素类可溶于热碱液中，加酸又析出，故可用0.5%氢氧化钠水溶液(或醇溶液)加热提取，提取液冷却后再用乙醚除去杂质，然后加酸调节PH至中性，适当浓缩，再酸化，则香豆素类及其苷即可析出。但必须注意，不可长时间加热，以免破坏内酯环。(三)系统溶剂法从中药中提取香豆素类化合物时；可采用系统溶剂提取法。常用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇顺次萃取。石油醚对香豆素的溶解度不大，其萃取液浓缩后即可得结晶。乙醚是多数香豆素的良好溶剂，但亦能溶出其他能溶性成分，如叶绿素、腊质等。其他极性较大的香豆素和香豆素苷，则存在于甲醇或水中。(四)色谱方法结构相似的香豆素混合物最后必须经色谱方法才能有效分离，柱色谱吸附剂可用中性和酸性氧化铝以及硅胶，碱性氧化铝应慎用。常用己烷和乙醚，已烷和乙酸乙酯等混合溶剂洗脱。其他吸附剂有用混以甲酰胺或乙二醇的纤维素来分离呋喃香豆素或酯类香豆素，用活性炭一硅藻土混合物分离香豆素苷类的。
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