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细胞转染后的效果观察 细胞铺完板可以直接转染吗?用的是lipo3000不用换液的那种?

2021-04-24知识2

GFP稳定转染的细胞做免疫荧光,被固定后到最后荧光显微镜下观察时, GFP还发荧光吗? 是发光的。给你看篇文章:《细胞固定剂对GFP发光特性影响的研究》文章链接:http://wenku.baidu.com/link?url=xpDxTXHRaDE9bO7r8bwXPrXP0qQXre3R4eofPUoTD041dU2TBfYN6gAiC5fl53CdRuaeLNgCGZrylkQZH_lx2AXScLGGixDAkpiN1E2dWFG

转染 后用荧光显微镜观察细胞是否有荧光出现 在 我最近常做这个实验,2113GFP也在N端,与5261目的蛋白融合表达,我4102对COS-1转染该融合片段的感想总结如下:16531)转染细胞状态一定要好,这是成败的关键。我选择的是早晨消化COS,分瓶密度高,下午即在60%满时,就转染1-2ugDNA,6hr换液用低血清(1%FBS)DMEM维持2)GFP-目的蛋誉核清白由于CMV启动子问题,庆前表达效率太高,对细胞的正常状态不利,尤其是细胞状态不好的细胞。所以常有细胞漂浮起来、凋亡的现象,看荧光时,可以将细胞上清洗涤后观察。3)根据不同蛋白的性质决定的,有的蛋白具有NES、NLS或跨膜区、信号肽等功能性序列,可能将GFP带到胞外4)细胞的性质决定GFP位置:如COS细胞,常形成液氏猛泡,占据大量胞浆,GFP有时会沿着这种胞液分布,要选择高倍镜观察5)观察要仔细,选择可见光和高倍数荧光看祝您成功!

GFP稳定转染的细胞做免疫荧光,被固定后到最后荧光显微镜下观察时, GFP还发荧光吗? GFP稳定转染的细胞做免疫荧光,被固定。http://wenku.baidu.com/link?url=xpDxTXHRaDE9bO7r8bwXPrXP0qQXre3R4eofPUoTD041dU2TBfYN6gAiC5fl53CdRuaeLNgCGZrylkQZH_lx2AXSc。

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