细菌内毒素检测标准操作 原发布者：wca66细菌内毒素检测（凝胶法）标准操作目的：规范细菌内毒素的检测操作，保证细胞质量。范围：适用于所有从治疗中心发放的细胞（包括CIK、DC、干细胞等）内毒素限量检测。责任人：质量检测人员材料：一、电热干燥箱 除外源性内毒素用，温度应能达到180℃。二、恒温水浴箱或适宜的恒温器（37℃±1℃）。三、水银温度计，精度在1℃以下，量程不小于50℃。四、旋涡混合器。五、可调式移液器六、0.25EU/ml鲎试剂。七、细菌内毒素工作品。八、凝胶法细菌内毒素检查用水。九、实验用具 无热原吸头（1000μl、200μl）、带铝盖的凝集管（10mm×75mm）、试管架、计时器、75%酒精棉球、封口膜、剪刀、镊子、砂轮。所用玻璃器皿使用前须经250℃干烤至少1小时或180℃干烤至少4小时。操作方法一、取样1、细胞发放前3天，取细胞培养液约2ml，分装于2个带铝盖的凝集管中各约1ml左右，如不立即试验4℃存放（可存放多长时间）。2、细胞发放当天，取细胞生理盐水混悬液约2ml，分装于2个带铝盖的凝集管中各约1ml左右，如不立即试验4℃存放。（可存放多长时间）。3、取样应以无菌操作技术取样，所用器材在使用前应无热原或已去除热原。二、鲎试剂灵敏度复核鲎试剂灵敏度复核的目的是。
细菌内毒素国家药典是怎么检测的？ 10版国家药典检测内毒2113素可以用凝胶法凝胶法是通5261过鲎试剂与内毒素产生凝集4102反应的原理1653来检测或半定量内毒素的方法。鲎试剂灵敏度复核试验在本检查法规定的条件下，使鲎试剂产生凝集的内毒素的最低浓度即为鲎试剂的标示灵敏度，用EU/ml表示。当使用新批号的鲎试剂或试验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时，应进行鲎试剂灵敏度复核试验。以上摘自2010版中国药典《细菌内毒素检查法》
细菌内毒素干扰试验具体做法 细菌内毒素干扰试验 按表1制备溶液A、B、C和D，使用的供试品溶液应为未检验出内毒素且不超过最大有效稀释倍数（MVD）的溶液，按鲎试剂灵敏度复核试验项下操作。只有当溶液A和阴性对照溶液D的所有平行管都为阴性，并且系列溶液C的结果在鲎试剂灵敏度复核范围内时，试验方为有效。按下式计算C和B的反应终点浓度的几何平均值（Es和Et）。Es=1g-1(∑Xs/4)Et=1g-1(∑Xt/4)式中Xs、Xt分别为系列溶液C和溶液B的反应终点浓度的对数值（1g）。当Es在0.5λ-2λ(包括0.5λ和2λ)及Et在0.5Es-2Es(包括0.5 Es和2 Es)时，认为供试品在该浓度下无干扰作用。若供试品溶液在小于MVD的稀释倍数下对试验有干扰，应将供试品溶液进行不超过MVD的进一步稀释，再重复干扰试验。表1 凝胶法干扰试验溶液的制备 编号内毒素浓度/配制内毒素的溶液稀释用液稀释倍数所含内毒素的浓度平行管数A无/供试品溶液-2B2λ/供试品溶液供试品溶液1 2 4 82λ 1λ 0.5λ 0.25λ4 4 4 4C2λ/检查用水检查用水1 2 4 82λ 1λ 0.5λ 0.25λ4 4 4 4D无/检查用水-2注：A 供试品溶液；B干扰试验系e79fa5e98193e58685e5aeb931333332626666列；C鲎试剂标示灵敏度的对照系列；D阴性对照。可通过对供试品进行更大倍数的。
