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谁能具体解释一下荧光定量PCR中溶解曲线的意思以及作用 pcr溶解曲线不光滑

2021-04-23知识3

PCR常见的曲线异常 去文库,查看完整内容>;内容来自用户:残鹰的等待2018/9/10QPCRFAQ(四)-常见的曲线异常_搜狐科技_搜狐网QPCRFAQ(四)-常见的曲线异常2017-09-0816:02诺唯32313133353236313431303231363533e59b9ee7ad9431333433646366赞原标题:QPCRFAQ(四)-常见的曲线异常小V是真心地希望并祝福科研宝宝们实验都顺顺利利~可科研做多了,总会遇到各种奇葩结果,比如下面这些情况…不用担心,小V帮你找原因。1、扩增曲线形状异常a、扩增曲线不光滑:信号太弱,经系统矫正后产生。提高模板浓度重复实验。扩增曲线断裂或下滑:模板浓度较高,基线的终点值大于Ct值。减小基线终点(Ct值-4),重新分析数据。https://www.sohu.com/a/190404653_2168351/72018/9/10QPCRFAQ(四)-常见的曲线异常_搜狐科技_搜狐网图1基线设置不当扩增曲线c、个别扩增曲线突然骤降:反应管内留有气泡,由于温度升高后气泡破裂,使仪器检测到的荧光值突然降低所致。进行扩增反应之前要仔细检查反应管内是否有气泡残留。d、扩增曲线呈锯齿状且不连续:ROX添加不当,需校正参比染料。https://www.sohu.com/a/190404653_2168352/72018/9/10QPCRFAQ(四)-常见的曲线异常_搜狐科技_搜狐网2、反应结束。

谁能具体解释一下荧光定量PCR中溶解曲线的意思以及作用? 用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一.反应结束后,逐渐加温.和Syber Green分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和Syber Green结合.一般每加温一度,读一次信号.当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多.曲线的横坐标是温度,而纵坐标是荧光信号的变化。开始加热,信号变化不大,所以几乎是平的,接近Tm时,突然变化加大,所以出现峰值.再升温,产物全部解离,就又是一条直线了.如果有非特异性产物,在加热过程中就会出现一些比较矮,宽的峰.

溶解曲线不好荧光定量pcr的数据就用不了吗 是的。你说的不好时哪种不好?有非特异性扩增峰,只有引物二聚体的溶解曲线,数据都不能用了

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