做ELISA时要用到TMB显色液，怎么配制？效果怎么样？有人试过没有？配方一：底物显色A液：醋酸钠13.6g，柠檬酸1.6g，30%双氧水0.3ml，蒸馏水加至500ml.底物显色B液：乙二胺四乙酸二钠。
四甲基联苯胺的应用 TMB的反应产物为深蓝色，利于光镜观察，且反应产物越聚越大，常超出单个细胞器的范围（而DAB则被限制在其内），故TMB反应的检测阈较低。由于上述优点，目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是：TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外，TMB是一种较强的皮肤刺激剂，并有致癌的潜在可能，故使用时应带手套及在通风条件下操作。TMB经HRP作用后共产物显蓝色，目视对比鲜明。TMB性质较稳定，可配成溶液试剂，只需与H2O2溶液混和即成应用液，可直接作底物使用。另外，TMB又有无致癌性等优点，因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后，TMB产物由蓝色呈黄色，可在比色计中定量，最适吸收波长为450nm。ABTS虽不如OPD和TMB敏感，但空白值极低，也为一些试剂盒所采用
四甲基联苯胺血检原理 中文名称：32313133353236313431303231363533e58685e5aeb9313333396661333，3'，5，5'-四甲基联苯胺英文名称：3，3'，5，5'-Tetramethylbenzidine英文别名：TMB；4，4'-Bi-2，6-xylidine；4，4'-Diamino-3，3'，5，5'-tetramethylbiphenylCAS号：54827-17-7线性分子式：[-C6H2(CH3)2-4-NH2]2纯度：≥99.5%等级：BRMDL号：MFCD00007748Beilstein号：2808541EC号：259-364-63，3’5，5—四甲基联苯胺（简称TMB）是一种新型安全的色原试剂。与传统的色原试剂联苯胺，邻联甲苯胺及邻苯二胺等以上比较，TMB具有检测灵敏度高，稳定性好等优点，而且使用安全。经动物实验和Ames细菌自动变异性试验结果表明，TMB作为非致癌物和非致突变物。目前TMB已在逐步取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物，应用于临床化验，法医检测，刑事侦破及环境检测等领域。尤其是在临床生化检验方面，TMB作为过氧化酶的新底物，在酶免疫公析法（EIA）和酶联免疫吸附检验法（ELISA）获得了广泛应用。TMB主要应用项目如下：1、尿联试纸的配制 2、肝炎病毒的检测3、妊娠检测试验 4、血液和尿液中葡萄糖、血红蛋白、白蛋白的快速测定5、粪便隐血试验 6、血液中粒细胞值的检测7、类固醇、性。
