rt pcr的原理及步骤 由一条rna单链转录2113为互补dna(cdna)称作“逆转录5261”，由依赖4102rna的dna聚合酶（逆转录酶）来完成。随后，dna的另1653一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖dna的dna聚合酶完成，随每个循环倍增，即通常的pcr。原先的rna模板被rna酶h降解，留下互补dna。rt-pcr的指数扩增是一种很灵敏的技术，可以检测很低拷贝数的rna。rt-pcr广泛应用于遗传病的诊断，并且可以用于定量监测某种rna的含量。（检测基因表达的方法，参见northernblot法。rt-pcr的关键步骤在是rna的反转录，要求rna模版为完整的且不含dna、蛋白质等杂质。常用的反转录酶有两种，即鸟类成髓细胞性白细胞病毒（avianmyeloblastosisvirus，amv）反转录酶和莫罗尼鼠类白血病病毒（moloneymurineleukemiavrius，mmlv）反转录酶。rt-pcr有时候也会指代实时pcr(real-timepcr)。为了与逆转录pcr相区别，通常被写作“定量pcr”(quantitativepcr)或者rtq-pcr(real-timequantitativepcr)。
如何选择绝对定量RT-PCR的数据统计分析方法 对照组13只老鼠，且每个组对应着三组重复试验的数据。我不知道该怎么分析基因在两组间表达的差异性。谢谢各位友人相助啊我做完。
rna-seq 为什么要打断mrna后构建文库 真核生物的mRNA分子是单顺反子，是编码蛋白质的基因转录产物。真核生物的所有蛋白质归根到底都是mRNA的翻译产物，因此，高质量mRNA的分离纯化是克隆基因、提高cDNA文库构建。
