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ABI PCR仪校准试剂盒 PCR试剂盒会选择PCR仪么

2021-04-23知识4

abi试剂什么样 ABI是美国DNA检测公司的缩写,试剂分很多种,市场基本不会有冒牌货,因为技术含量很高,试剂包括:荧光引物、酶、9947、PCR、内标等组合而成.

实时定量/real time PCR 预混试剂盒产品说明,OeShieSyrGreereMix(2×coc.)含有RealTimePCR反应所需要的TaqPolymerae、ReactioBuffer(包含适当浓度的Mg2+和dNTP)、。

pcr仪使用时,在设定反应程序时,一共分了多少个步骤 1.常规程序将PCR反应所需的成分配置完后,在PCR仪上于94-96℃预加热几十秒至几分钟,使模板DNA充分变性,然后进入扩增循环。在每一个循环中,先于94℃保持30秒钟使模板变性,然后将温度降到复性温度(一般50-60℃之间),一般保持30秒钟,使引物与模板充分退火;在72℃保持1分钟(扩增1kb片段),使引物在模板上延伸,合成DNA,完成一个循环。重复这样的循环25~35次,使扩增的DNA片段大量累积。最后,在72℃保持3-7min,使产物延伸完整,4℃保存。2.复性(退火)和延伸温度复性的温度是PCR扩增是否顺利的关键因素,通常在50-60℃之间。具体的温度主要由引物的Tm值决定。延伸温度绝大多数设定为72℃。如果复性的温度很高,可以将延伸温度和复性温度设置成同一温度,变成二步法PCR。3.反应时间变性步骤一般使用30秒钟,如果模板的G+C含量较高,或直接用细胞做模板,变性时间可适当延长。复性时间有30秒种一般是足够的。延伸时间由扩增产物的大小决定,一般采用1kb用1分钟来保证充足的时间。4.循环次数循环次数主要与模板的起始数量有关,在模板拷贝数为104~105数量级时,循环数通常为25~35次。平台效应(plateaueffect):PCR扩增过程后期会出现的产物的。

#ABI PCR仪校准试剂盒

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