PCR结果没有条带，都是弥散的，这是为什么 首先怀2113疑，特异性不好，解5261决办法：1，可能是模4102板量过高1653，降低模板浓度10-1000倍；版2，适当提高退火温度1-3度，或权者先用高于你以往退火温度的1-3度先p上5个循环，再用先前温度p剩余的循环（也就是在程序中多设置2步）；3，稍降Mg离子浓度，如果以前加1.5ul的，试试1-1.2ul；如果以上方案还不能解决，就要检查你的模板、引物和taq，重新提模板、重新稀释引物，以及用新的pcr试剂。若有疑问，欢迎继续讨论，纯属手打，欢迎采纳，祝实验顺利！
PCR产物电泳检测结果点样孔很亮，没有目的条带。是什么原因？marker的条带正常.谢谢！未解决问题 等待您来回答 奇虎360旗下最大互动问答社区
半定量PCR之前需要做普通PCR，为什么有些需要做一次 荧光e68a84e8a2ad62616964757a686964616f31333365653136定量PCR和半定量RT-PCR都可以用来检测基因的表达量的，但二者检测的东西多少有些不同。荧光定量PCR是在PCR反应体系中加入可以和双链DNA特异性结合的荧光染料（sybr green）或者和目的DNA片段结合的荧光探针（taqman)，通过监控PCR过程中的荧光的变化，并且和某些管家基因的荧光变化进行对比反应出目标基因的表达量。荧光定量PCR的主要有效数据是荧光信号增长到最大值的一半时的时间。半定量RT-PCR则是通过RT-PCR最终产物电泳后电泳条带的明暗来间接反应出原始模板的丰度。荧光定量PCR因为是全程监控PCR扩增的变化，并且能够同管家基因的扩增曲线进行相对定量，而将基因的表达量数值化，准确度高于半定量RT-PCR。半定量RT-PCR因为是监控的最终产物，而在基因表达水平很高的时候，PCR体系很可能在反应中后期就饱和了，所以对于高水平表达的基因来说，用半定量RT-PCR并不能很准确的说明问题。但是如果要发表比较高档次的论文的话，某些变态的老外审稿并不认可单一的荧光定量PCR的结果，他们会同时需要作者做一个半定量RT-PCR来作为辅助证明。半定量RT-PCR的引物和荧光定量PCR的引物设计原则并不是一样的，换而言之。
