求 怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量 1、280nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收,在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克),但核酸在260 nm处的吸收更强,其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm处的消光系数是280 nm处的2倍;而蛋白质则相反,其280 nm的紫外吸收值大于260 nm的吸收值。3、215 nm与225 nm的吸收差法蛋白质的稀溶液由于含量低而不能使用280 nm的光吸收测定时,可用215nm与225 nm吸收值之差,通过标准曲线法来测定蛋白质稀溶液的浓度。4、肽键测定法蛋白质溶液在238 nm处的光吸收的强弱,与肽键的多少成正比。因此可以用标准蛋白质溶液配制一系列50~500 mg/mL已知浓度的5.0 mL蛋白质溶液,测定238 nm的光吸收值A238,以A238为纵坐标,蛋白质含量为横坐标,绘制出标准曲线。未知样品的浓度即可由标准曲线求得。扩展资料:紫外分光光度法原理光谱法(spectrometry)是基于物质与电磁辐射作用时,测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法;或。紫外可见分光光度计的具体使用方法 使用前仪器要调零、调百校准,参比溶液又称空白溶液.测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液.通常,用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线.有时,基体中虽不含被测物质,但含有别的物质,这.紫外分光光度计测定蛋白质含量,紫外分光光度计在调校好对应的波长后,可以测定待测定定的蛋白质的浓度等等。如何用紫外分光光度计,测量水中二甲苯的浓度(步骤)?如果里面有菌,会不会影响它的吸光度?(用吐温 80 助溶) 紫外分光光度计 是不是样品没摇匀.或者中间所用的试剂有问题,如果这些都没有问题,那就是分光光度计有问题啦nanodrop 和紫外分光光度计的区别 一、产品应用ND-2000是目前国内外实验室中使用最为广泛的一款微量分光光度计,其优越的性能、准确的结果赢得了广大用户的好评。该产品可用于以下几个方面:紫外检测:常规紫外光波长下检测样品吸光值;核酸检测:可检测dsDNA、ssDNA、RNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm、280nm处的吸光值;探针检测:检测荧光标记探针的吸光值,可用于去除未能标记探针的样品;细胞培养物检测:检测细胞培养物在600nm处的吸光值;蛋白检测:检测普通纯化后蛋白的浓度和280nm处的吸光值;蛋白标记检测:可检测被BCA、Bradford或Lowry标定的蛋白样品,自动画出标准曲线并计算出待测蛋白质浓度。二、产品简介NanoDrop 2000超微量分光光度计是NanoDrop的最新产品,应用液体的表面张力特性,样品体积只需要 0.5~2ul,在检测台上,经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量、高浓度、免石英管、免毛细管等耗材检测吸收值的优点。此产品设计受专利保护,并在全世界广受欢迎,其准确度与便利性让科学家得以更有效率进行各项研究。NanoDrop 2000使用高能量氙灯(pulsed xenon flash lamp)可提供190~840nm的全光谱检测,且不需要暖机,开机后立即使用。搭配高感度CCD array检测器,。在 用紫外可见分光光度计测定吸收光谱时 用紫外可见分光光度计测定吸收光谱时,所配的配合物溶液的浓度并不需要配的十分准确。因为这里的生色剂的量一定是过量的。既然是过量,过多一点,过少一点不影响测定的准确。
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