热稳定DNA聚合酶的本质是什么 蛋白质
TaqDNA聚合酶的校对活性 该酶无校对活性，易产生错配碱基。TaqDNA聚合酶的种类a，保真性的一个通用标准是错配率，错配率越低保真性越好。普通 Taq 酶的错配率在 10-5 碱基/循环数，而高保真 Taq 酶错配率可降到 10-6 数量级，大大降低了出错的可能性；它适合对 PCR 保真性要求较高的实验，如基因筛选、测序、突变检测等等。高保真 Taq 酶的保真原理是：高保真 Taq 酶具有 3‘到 5’核酸外切酶的活性。市面上主要有两类产品：一类是混合型的高保真酶，将带有 Proofreading 活性的酶与普通 Taq 酶（用于提高扩增效率）混合起来；另一类是单一型的高保真酶。b，热启动Taq酶（高特异Taq酶）：在 PCR 第一个循环变性之前，有一个升温的过程，引物和模板会有一些非特异性配对，如果这时 Taq 酶发挥活性，就很容易产生非特异性扩增，由于循环初期模板量非常少，产生的非特异性条带经过后面的指数扩增，就会严重干扰目的片段的扩增，甚至导致特异性条带不能扩出；而热启动 Taq 酶是必需经过高温才能激活的酶，因此在初始循环的变性之前它没有活性，不会产生非特异性扩增，这就大大提高了 PCR 扩增的特异性。c，高耐热Taq酶：对于有些模板变性温度较高，需要时间较长，可能要求高耐热性 Taq 酶，如 。
TaqDNA聚合酶是什么酶？其作用是什么？ TaqDNA聚合酶 Taq DNA聚合酶是从一种水生栖热菌(Thermusaquaticus)yT1株分离提取的.yT是 一种嗜热真菌，能在70～75℃生长.该菌是1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉中分离的.该酶基因全长2496个碱基，编码832个氨基酸，酶蛋白分子为 94KDa.其比活性为200000单位/mg.75～80℃时每个酶分子每秒钟可延伸约150个核苷 酸，70℃延伸率大于60个核苷酸/秒，55℃时为24个核苷酸/秒.温度过高(90℃以上)或过低(22℃)都可影响Taq DNA聚合酶的活性，该酶虽然在90℃以上几乎无DNA合成，但确有良好的热稳定性，在PCR循环的高温条件下仍能保持较高的活性.在92.5℃、95℃、97.5℃时，PCR混合物中的Taq DNA聚合酶分别经130min，40min和5～6min后，仍可 保持50%的活性，实验表明.PCR反应时变性温度为95℃～20sec，50个循环后，Taq DNA聚合酶仍有65%的活性.Taq DNA聚合酶的热稳定性是该酶用于PCR反应的前提条 件，也是PCR反应能迅速发展和广泛应用的原因.Taq DNA聚合酶还具有逆转录活性，其作用于类似逆转录酶.此活性温度一般为65～68℃，有Mn2+存在时，其逆转录活性 更高.TaqDNA聚合酶是Mg2+依赖性酶，该酶的催化活性对Mg2+浓度非常敏感.以活性程度 很低的鲑鱼精子DNA为模板，dNTP的浓度为0.7～0.8mmol/L时，用不同。
