请问PCR中的单位换算？ 以25ul的pcr体系为例，一般用浓度是25μmol/L的dNTP 2ul，10μmol/L的引物1ul，2.5 mmol/L Mg2+2ul，模版一般1ul，2000u 的酶0.5ul.buffer一般选用10x，就是稀释10倍使用，每25ul体系加10xbuffer 2.5ul.u是酶活力单位.ng.
DNA聚合酶I有哪些活性？ emphasis：role=italicE.coliemphasis：DNA聚合酶I为单链多肽，分子量109ku，有四种活性。（1）5′3′DNA聚合酶活性：反应底物为单链DNA及引物（带3′-OH基）或5′突出的双链DNA。（2）5′3′外切核酸酶活性：反应底物是双链DNA或DNA∶RNA杂交体，它可从5′端降解双链DNA，也降解RNA∶DNA中的RNA（RNase：H活性）。（3）3′5′外切酶活性：反应底物是带3′-OH的双链DNA或单链DNA，其活性从3′-OH端降解DNA，可被5′3′聚合活性封闭，也可被带5′磷酸的dNMP所抑制。（4）交换（置换）反应：如果只有一种dNTP存在，3′5′外切活性将从3′-OH端降解DNA，然后在该位置发生一系列连续的合成和外切反应，直到露出与该dNTP互补的碱基。总之，在没有dNTP的情况下，外切活性占主导地位，而当存在足够的dNTP时，外切活性和合成活性将处在动态平衡中，结果使得双链DNA成为平末端。
DNA聚合酶具备几种活性？用途是什么？ [1]聚合作用：在引物RNA'-OH末端，以dNTP为底物，按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去，就是DNApolⅠ的聚e68a843231313335323631343130323136353331333330353437合作用。酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用。dNTP进入结合位点后，可能使酶的构象发生变化，促进3'-OH与5'-PO4结合生成磷酸二酯键。若是错误的核苷酸进入结合位点，则不能与模板配对，无法改变酶的构象而被3'-5'外切酶活性位点所识别并切除之。[2]3'→5'外切酶活性─校对作用：这种酶活性的主要功能是从3'→5'方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸。当反应体系中没有反应底物dNTP时，由于没有聚合作用而出现暂时的游离现象，从而被3'→5'外切酶活性所降解。如果提高反应体系的温度可以促进这种作用，这表明温度升高使DNA生长链3'末端与模板发生分离的机会更多，因而降解作用加强。当向反应体系加入dNTP，而且只加放与模板互补的上述核苷酸才会使这种外切酶活性受到抑制，并继续进行DNA的合成。由此推论，3'→5'外切酶活性的主要功能是校对作用，当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3'→5'外切酶切除，以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸。。
