稀释涂布平板法的步骤 平板点值接种法

平板划线法的步骤 1．融化培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。2．倒平板：待培养基冷却至50℃左右，按无菌操作法倒2只平板(每皿约15m1)，平置，待凝固。倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管(瓶)塞(也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完，管塞或瓶塞则不必夹在手中)。左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速例入培养基约15m1，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。3．作分区标记在皿底将整个平板划分成A、B、C、D四个面积不等的区域。各区之间的交角应为120℃左右（平板转动一定角度约60℃），以便充分利用整个平板的面积，而且采用这种分区法可使D区与A区划出的线条相平行，并可避免此两区线条相接触。4．划线操作(1)挑取他含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种。(2)划A区：将平板倒置于煤气（酒精）灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面，有培养基一面向着煤气灯(这时皿盖朝上，仍留在煤气微生物接种环境有什么要求？常用的接种方法有哪些 微生物接种需要在无菌条件下完成。常用的接种方法有以下几种：1）划线接种 这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。2）三点接种 在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。3）穿刺接种 在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。4）浇混接种 该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45°C左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。5）涂布接种 与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的稀释涂布平板法和平板划线法的区别 一、方法不同1、涂布平板法2113：根据微生物在固体培5261养基上所形成的单4102个菌落，即是由一1653个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法2、平板划线法：通过平板划线而获得微生物纯培养物的方法。二、方式不同1、涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。三、用处不同1、涂布平板法：用于某些成品检定（如杀虫菌剂等）、生物制品检验、土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。2、平板划线法：用来培养小型菌落。参考资料来源：百度百科-划线平板参考资料来源：百度百科-涂布平板法微生物培养方法,在实验室中将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。稀释涂布平板法的步骤 稀释操作：1、将分别盛有9ml水的6支试管灭菌,并按10^1到10^6的顺序进行编号.2、用移液试管吸取1ml培养的菌夜,注入10^1倍稀释的试管中.用手指轻压移夜管上的橡皮,吹吸三次,使菌液与水充分混匀.3、从10^1倍稀释的试管中吸取1ml稀释液,注入10^2倍稀释的试管中,重复第二步的混匀操作.以此类推,直到完成最后一支试管的稀释.注意：移夜管需要经过灭菌.操作时,试管口和移夜管应在离火焰1~2cm处涂布操作：1、将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中.2、取少量菌夜（不超过0.1ml）滴加到培养基表面.3、将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8~10s.4、用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面,涂布时可转动培养皿,使菌液分布均匀.注意：1.将涂布器末端浸在盛有体积分数为百分之七十的酒精的烧杯中.取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃.平板划线法和稀释涂布平板法各有什么优缺点？ 平板划线法的优点：便于观察菌落特征，对混合菌进行分离。缺点：不能准确计数。稀释涂布平板法的优点：便于计数，便于观察菌落特征。缺点：吸收量较少，平板不干燥效果不好，易蔓延。稀释涂布平板法一般多用于筛选菌株，而平板划线法一般多用于纯化菌株，二者目的不完全相同。平板划线法的原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的，而稀释涂布平板法一般用于某些成品检定（如杀虫菌剂等）、生物制品检验、土壤抄含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。扩展资料：平板划线法由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划zd线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。稀释涂布平板法先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释，然后分别取不同稀释液少许，与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出出菌落。参考资料来源：百度百科-平板划线法参考资料来源：百度百科-涂布平板法2.无菌技术 1前最美丽的.2.拍摄的彩虹彩虹稀彩虹消失了叹息愤怒的遗憾 4.“过眼.”这是最大的收藏境界.保留的意图,无论多么美丽的景色还没有被肢解,然后时间长了会不会褪色.[生物一选修1：生物技术实践](15分） （1）微生物接种的稀释涂布平板法是将菌... （1）梯度稀释? 培养?? （2）0.1﹪氯化汞溶液??? 外植体消毒不彻底??? 固体??? 高（3）萃取法 ?? 压榨???? 鲜为解决塑料袋造成的“白色污染”这一问题，某同学试图从土壤中寻找一种能加速塑料袋自然降解过程的目的菌。以下是该同学从土壤中寻找并筛选目的菌的流程，请回答下列问题： 高压蒸汽灭菌法?将未接种的培养基（空白培养基）放在适宜温度恒温箱中倒置培养一段时间，观察是否有菌落生成?1.02×106 菌液浓度过高(或稀释倍数不够）可以通过增大稀释平板划线法和稀释涂布平板法各有什么优缺点? 一、平板划线分离法由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落.二、稀释倒平板法先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如 1∶10、1∶100、1∶1000、1∶10000…）,然后分别取不同稀释液少许,与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出出菌落.如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的.随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养.稀释涂布法：优点：可以计数,可以观察菌落特征.缺点：吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延.一般用于平板培养基的回收率计数!稀释混合平板法：优点：可以计数,吸收量为1ml,较方便.优点：不能观察菌落特征.一般用于菌落总数的计数!平板划线法：优点：可以观察菌落特征,对混合菌进行分离!缺点：不能计数一般用于从菌种的分纯!涂布法使用较多,但有时不均匀 稀释倒

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