检测细胞增殖常用的方法有哪些谢谢(细胞 一、MTT比色:MTT比色是一种目前被广泛采用的检测细胞生长和存活的方法,其原理是外源性MTT(四唑盐)可被活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原成难溶的蓝紫色结晶物并沉淀在细胞中,而死细胞无此功能,DMSO(二甲基亚砜)能溶解细胞中的紫色结晶物,用酶联检测仪在490nm波长处检测其光密度值,可间接反映活细胞数量。在一定范围内,MTT结晶物形成的量与细胞数成正比,此方法已广泛用于检测细胞活力、观察细胞生长等方面,具有灵敏度高、重复性好、操作简便、经济、快速、易自动化、无放射性污染等特点,与细胞计数有良好的相关性。二、rdU标记法1.细胞以1.5×105/ml细胞数接种于直径35ml培养皿中(内放置一盖玻片),培养1天,用含0.4%FCS培养液同步化3天,使绝大多数细胞处于G0期。2.终止细胞培养前,加入BrdU(终浓度为30μg/L),37℃,孵育40min。3.弃培养液,玻片用PBS洗涤3次。4.甲醇/醋酸固定10min。5.经固定的玻片空气干燥,0.3%H2O2-甲醇30min灭活内源性氧化酶。6.5%正常兔血清封闭。7.甲酰胺100℃,5min变性核酸。8.冰浴冷却后PBS洗涤,加1抗即抗小鼠BrdU单抗(工作浓度1:50),阴性对照加PBS或血清。9.按ABC法进行检测,苏木素或伊红衬染,。开展生物监测,涉及哪些具体监测技术与方法。 生物监测又称“生物测定”,是利用生物对环境中污染物质的敏感性反应来判断环境污染的一种手段,用来补充物理、化学分析方法的不足。如利用敏感植物监测大气污染;。亚硝酸盐检测方法 1.食盐中亚硝酸盐的快速检测及食盐与亚硝酸盐的快速鉴别:用袋内附带小勺取食盐1平勺,加入到检测管中,加入蒸馏水或纯净水至1ml刻度处,盖上盖,将固体部分摇溶,10分钟后。亚硝酸盐检测方法是什么? 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:tiny19850513亚硝酸盐测定 1、原理2113 样品经沉淀蛋白质、除5261去脂肪后,在弱酸条件下亚硝酸盐4102与对氨基苯磺酸重氮化后,再1653与N-1-萘基乙二胺偶合形成紫红色染料,与标准比较定量。2、试剂 实验用水为蒸馏水,试剂不加说明者,均为分析纯试剂。2.1 氯化铵缓冲液:1L容量瓶中加入500mL水,准确加入20.0mL盐酸,振荡混匀,准确加入50mL氢氧化铵,用水稀释至刻度。必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调试至pH9.6~9.7。2.2 硫酸锌溶液(0.42mol/L):称取120g硫酸锌(ZnSO4·7H2O),用水溶解,并稀释至1L。2.3 氢氧化钠溶液(20g/L):称取20g氢氧化钠用水溶解,稀释至1L。2.4 对氨基苯磺酸溶液:称取10g对氨基苯磺酸,溶于700mL水和300mL冰乙酸中,置棕色瓶中混匀,室温保存。2.5 N-1-萘基乙二胺溶液(1g/L):称取0.1gN-1-萘基乙二胺,加60%乙酸溶解并稀释至100mL,混匀后,置棕色瓶中,在冰箱中保存,一周内稳定。2.6 显色剂:临用前将N-1-萘基乙二胺溶液(1g/L)和对氨基苯磺酸溶液等体积混合。2.7 亚硝酸钠标准溶液:准确称取250.0mg于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠,加水溶解移入500mL容量瓶中,加100mL氯化铵缓冲液,。生物监测的生物监测手段 主要有:①利用指示生物bai来监测,如根据颤蚓、蛭等大型底栖无脊椎动物和摇蚊幼虫,以及某些浮游生物在水体中的出现和消失、数量的多少等来监测水体的污染状况。利用污水生物系统监测水体污染也是一种常用的手段。②利用水生生物群落结构的变化来监测。du水质状况发生变化,水生生物群落结构也会发生相应的改变。在有机物污染严重、溶解氧很低的水体中,水生生物群落的zhi优势种只能由抗低溶解氧的种类组成;未受污染的水体,水生生物群落的优势种则必然是一些清水种类。在利用指示生物和群落结构监测水体污染时,还引用了生物指数和生物种的多样dao性指数等数学手段,简化监测的方法。③水污染的生物测试,即利用水生生物受到污染物的毒害所产生的生理机能的变化,测试水质污染的状况。这种方法可以测定水体的单因素污染,对测定复合专污染也能收到良好的效果。测试方法分为静水式生物测试和流水式生物测试。对土壤污染进行生物监测也是一种可行的途径,但国内外做的工作还不多。环境系统十分复杂,生物监测只有与属物理、化学监测结合起来,才能取得更好的效果。
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