简述凯氏定氮法测定蛋白质时所用到的试剂及其作用 有机物中的胺根在强热和CuSO4，浓H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4反应式为： 2NH2+H2SO4+2H=(NH4)2SO4（其中CuSO4做催化剂） 2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出。
凯氏定氮法测定蛋白质含量时'消化时应注意什么 （1）样品应是均匀的.固体样品应预先研细混匀，液体样品应振摇或搅拌均匀.（2）样品放入定氮瓶内时，不要沾附颈上.万一沾附可用少量水冲下，以免被检样消化e799bee5baa6e78988e69d8331333337616465不完全，结果偏低.（3）硝化时如不容易呈透明溶液，可将定氮瓶放冷后，慢慢加入30%过氧化氢（H2O2）2-3ml，促使氧化.（4）在整个消化过程中，不要用强火.保持和缓的沸腾，使火力集中在凯氏瓶底部，以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下，使氮有损失.（5）如硫酸缺少，过多的硫酸钾会引起氨的损失，这样会形成硫酸氢钾，而不与氨作用.因此，当硫酸过多的被消耗或样品中脂肪含量过高时，要增加硫酸的量.（6）加入硫酸钾的作用为增加溶液的沸点，硫酸铜为催化剂，硫酸铜在蒸馏时作碱性反应的指示剂.（7）混合指示剂在碱性溶液中呈绿色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈红色.如果没有溴甲酚绿，可单独使用0.1%甲基红乙醇溶液.（8）氨是否完全蒸馏出来，可用PH试纸试馏出液是否为碱性.（9）吸收液也可以用0.01当量的酸代表硼酸，过剩的酸液用0.01N碱液滴定，计算时，A为试剂空白消耗碱液数，B为样品消耗碱液数，N为碱液浓度，其余均相同.（10）以硼酸为氨的吸收液，可省去标定碱液的操作，且硼酸的。
在凯氏定氮法中消化为什么不能加入大量硫酸钾 凯氏定氮的基本原理是使有机物中的来氮转化为铵盐，然后加碱蒸出氨气，然后酸碱滴定。其中消化自作用就是使有机氮变为铵盐，如果用硝酸，在加热、酸性情况下硝酸会氧化铵根，生成氮气、zhidao一氧化氮等物质，从而使定氮结果偏低或无法定出。
