pcr扩增目的片段时,在第几个循环后才能出现目的片段长度的双链DNA分子? 第二次比如目的基因是300bps,母链DNA2000bpsforward primer从母链第25碱基开始由5'-3'开始复制,backward primer从第325由3'-5'开始反向复制.第一次复制25—2000 和 325—1 两条.第二次复制以第一次产物为模板可以复制出 25-325 和 325-25这样两条.以后第二次复制的产物是指数增长,第一次和原始母链的增长都是按复制次数每次加1
PCR产物比目的条带大?????? 大很多吗?有时候电泳跑出来的带和MARKER对不上,但是送去测序的时候是没有问题的。要是你扩的很纯没杂带的话,干脆花几十块钱送去测序,反正现在测序也不贵。
PCR技术获取目的基因时为什么要至少经过3次循环才能从DNA分子中分离出目的基因 一般需要获得的基因是有一定长度的,而模板长度很长.设计的引物决定了扩增产物的长度.第一个循环,引物与模板互补,此时变成两个模板,但因为模板很长,没有什么终止扩增,所以第一个循环扩增出来的新片段很长很长.第二个循环以新的长片段为模板进行,但新片段的一端是引物开头的,所以第二个循环得到的片段就是我们需要的长度,但只是一条链,所以还不能分离出目的基因.第三个循环,当以第二个循环得到的新片段为模板时,因为这个片段的长度就是需要扩增的长度,所以当第三个循环完成时,这个片段是需要的长度,且是双链DNA,这就得到了需要的目的基因了.所以至少要3个循环才能分离出目的基因.