色谱柱柱效如何检测？ 不同的色谱柱有不bai同的测试方法du，来自不同厂家的同类色zhi谱柱也往往dao采用不同专的测试条件，所以最好按照色谱属柱说明书中的测试报告测定柱效。一般工作站的数据处理都有自动计算柱效的功能，若没有工作站，可由公式计算：柱效（理论塔板数）等于保留时间与峰宽的比值的平方再乘以16，或保留时间与半峰宽之比值的平方再乘以5.54。测定柱效时，不要接保护柱，同时注意连接的管路尽可能短，以减少死体积。自己测定的柱效有时会低于出厂时测试报告给出的值，因为一般情况下，应用实验室没有专门用于测试柱效的仪器。当然，使用了一段时间的色谱柱的柱效是会下降的。作为一个例子，下面给出Sepax的参考测试条件可用于C18（C8）柱效的测定。流动相：乙腈/水（65：35）(v/v)流速：1.0mL/min检测波长：254nm测试样品：Aniline（0.1%），Anisole（0.2%），Toluene（0.5%）(v/v)进样体积：2.0uL
正相色谱柱与反相色谱柱的区别 色谱柱的安装：1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积，进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线，同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前，确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳的连接效果，应尽量使用与色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头，如原来的接头长期匹配其他类型的色谱柱，建议在连接新色谱柱前应检查匹配情况，避免造成色谱柱的损坏或因色谱柱不匹配造成的漏液。3、使用PEEK 材料的通用接头，只需用手拧紧不需要特定扳手，使用压力为5000psi；使用温度不得超过100℃。流动相平衡：1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤，消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱，以免柱性能损坏（添加5％的有机溶剂冲洗色谱柱，同时可以达到对缓冲盐清洗的作用。。
高效液相色谱柱前保护柱具体怎么用 使用时应该用对应2113的保护柱，如C18柱用C18的保护柱。5261第一次使4102用时先冲洗干净保护柱，再连1653接到柱子上。保护柱的填料和柱子一样，所以也有一定的分离作用，但是会增加死体积。保护柱一般不会损坏柱子，柱子损坏先看是不是你使用不当造成的，例如C18柱不宜用PH大于7的流动相和纯水系流动相。
