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pcr扩增样品跑多少个循环 pcr扩增目的片段时,在第几个循环后才能出现目的片段长度的双链DNA分子?

2021-04-10知识9

pcr扩增目的片段时,在第几个循环后才能出现目的片段长度的双链DNA分子? 第二次比如目的基因是300bps,母链DNA2000bpsforward primer从母链第25碱基开始由5'-3'开始复制,backward primer从第325由3'-5'开始反向复制.第一次复制25—2000 和 325—1 两条.第二次复制以第一次产物为模板可以复制出 25-325 和 325-25这样两条.以后第二次复制的产物是指数增长,第一次和原始母链的增长都是按复制次数每次加1

pcr技术扩增时,每一轮循环使用的引物一样吗 PCR技术中扩增的是两引物之间的核苷酸序列,意思是采用该技术,可以大量扩增引物之间的序列,一般情况下,我们需要大量的某一基因的片段时,我们在基因的两端分别设计引物(一段一条),然后在体外,采用PCR的方法,用引物进行体外DNA复制

1 用PCR仪扩增细胞的DNA,所用的试剂和样品是什么?其循环条件是什么? 样品 可以2113用细胞 也可以用细胞里提5261取的DNA试剂 DNA聚合酶(依赖于你的目的选择普通4102Taq酶还是1653高保真Taq酶)DNA聚合酶附带的缓冲液,MgCl2(可能有可能没有,没有的一般是公司添加到额缓冲液里了)dNTP:四种脱氧核糖核苷酸无菌水循环条件:95℃ 3~10min95℃ 30sec55℃(取决于你的引物的退火温度,可以用梯度PCR摸索)30sec total 25~35 cycle72℃ 60sec(时间取决于你的酶的扩增效率与要扩增片段的长度,酶的说明书上有)72℃ 10min4℃ hold

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