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紫外分光光度计能否定量分析 紫外可见分光光度计定量分析的原理和方法是怎样的?

2020-07-27知识12

在紫外可见分光光度法的定量分析中误差来源有几个方面?如何避免? 紫外—可见分光光度分析法一、基本要求掌握:本章要求掌握分光光度法的特点、基本原理、测定方法及计算方法;分子吸收光谱与电子跃迁类型,物质对光的选择吸收与吸收光谱曲线,摩尔吸收系数与吸收系数,吸光度与透光度,偏离朗伯-比尔定律的原因;掌握显色反应条件及光度测量条件的选择;掌握紫外—可见分光光度计的主要部件,各部件的作用及仪器原理,主要类型及特点;掌握差示分光光度法的原理、特点.理物质分子结构与紫外吸收光谱的关系,吸收波长位移与分子结构变化的关系;紫外—可见分光光度定量分析影响结果准确度的各种因素.了了解紫外—可见分光光度法测定灵敏度和选择性的途径;双波长分光光度法等其它分光光度法定量测定的方法;紫外—可见分光光度法在有机化合物的结构解析方面的作用及在其他方面的应用.二、基本概念与重点内容A概述1.紫外—可见分光光度法的特点灵敏度与准确度较高;选择性较好;设备简单、操作简便.2.分光光度法的发展过程目视比色法 光电比色法 分光光度法3.分子的紫外—可见吸收光谱分子的紫外—可见吸收光谱是基于物质分子吸收紫外辐射或可见光,其外层电子跃迁而成,又称分子的电子跃迁光谱.紫外—可见分光光度法是基于物质分子的。在紫外分光光度分析中,通常如何选择定量分析用的测量波长?为什么 用全光谱扫描,得到的峰值就是最大吸收波长.最大吸收波长就是用来作测量波长,原因是使用最大吸收波长作为测量波长可使得所有物质有一个统一的选择过程,并且误差经过验证是最小的.紫外分光光度法中各定量方法有何优缺点 波长在200nm-400um范围称为紫外光,人眼能感觉到的光的波长大约在’400nm-760nm之间。物质吸收波长范围在200nm-760nm区间的电磁辐射能而产生的分子吸收光谱称为该物质的紫外—可见吸收光谱,利用紫外—可见光谱进行物质的定性、定量分析的方法称为紫外—可见分光光度法(ultlaviolet-visiblespectrophoto-metry)。紫外—可见分光光度法分为原子吸收光谱和分子吸收光谱两种。在本章中介绍的紫外—可见分光光度法为分子吸收光谱。紫外—可见分光光度法起源于20世纪60年代,该法可直接提供分子中有无芳香结构和共扼体系存在的信息,为物质的定性提供了一定的依据。紫外—可见分光光度法广泛地应用于物质的常量、微量及痕量组分的定量分析,已作为现代分析化学中“常规武器”的一种。定量的主要误差来源于共存物的谱线重叠而引起的光谱干扰,可运用现代分离技术及计算机辅助技术的应用而得以补偿。紫外可见分光光度法的定性,定量分析的依据是什么 其依据为当2113光穿过被测物质溶液时,物5261质对光的吸收程度随光的波长不同而变4102化。1653紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。光谱法(spectrometry)是基于物质与电磁辐射作用时,测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法;或分为原子光谱法和分子光谱法;或分为能级谱,电子、振动、转动光谱,电子自旋及核自旋谱等。分光光度法是光谱法的重要组成部分,是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度,对该物质进行定性和定量分析的方法。常用的技术包括紫外-可见分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法和原子吸收分光光度法等。扩展资料:对溶剂要求:含有杂原子的有机溶剂,通常均具有很强的末端吸收。因此,当作溶剂使用时,它们的使用范围均不能小于截止使用波长。例如甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm。另外,当溶剂不纯时,也可能增加干扰吸收。因此,在测定供试品前,应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求,即将溶剂置1cm。可以用紫外分光光度法对氨基酸,蛋白质进行定量分析吗 可以的紫外分光光度法也是一种重要的检测蛋白质浓度的方法。蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此,蛋白质具有吸收紫外光的性质,其最大吸收峰位于280 nm附近(不同的蛋白质吸收波长略有差别)。

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