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对流免疫电泳沉淀线不标准的原因 对流免疫电泳的观察结果

2021-04-09知识1

对流免疫电泳的原理 在pH值8.6的琼脂凝胶中,抗体2113球蛋白只带有微弱的负电5261荷,而且它分子又4102较大,所以泳动慢,受1653电渗作用的影响也大,往往不能抵抗电渗作用,故在电泳时,反而向负极倒退。而一般抗原蛋白质常带较强的负电荷,分子又较小,所以泳动快,虽然由于电渗作用泳动速度减慢,但仍能向正极泳动。如将抗原置阴极,抗体置阳极,电泳时,两种成分相对泳动,一定时间后抗原和抗体将在两孔之间相遇,并在比例适当的地方形成肉眼可见的沉淀线。这样由于电泳的作用,不仅帮助抗体定向移动,因而加速了反应的出现,而且也限制了琼脂扩散时,抗原抗体向四周自由扩散的倾向,因而也提高了敏感性,本法比琼脂扩散法的灵敏度要高10~16倍,而且反应时间短,可用于各种蛋白的定性和半定量测定。

对流免疫电泳实验中为什么会出现沉淀线 抗原抗体反应,可溶性抗原和抗体结合

对流免疫电泳的观察结果 断电后,将玻板置于灯光下,衬以黑色背景观察。阳性者则在抗原抗体孔之间形成一条清楚致密的白色沉淀线。如沉淀线不清晰,可把琼脂板放在湿盒中37℃数小时或置电泳槽过夜再观察。

#对流免疫电泳沉淀线不标准的原因

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