谁能具体解释一下荧光定量PCR中溶解曲线的意思以及作用？ 用Syber Green方法做完PCR后，用来判断产物是否相对专一.反应结束后，逐渐加温.和Syber Green分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链，就不能在和Syber Green结合.一般每加温一度，读一次信号.当温度到达PCR产物的Tm时，产物解离一下增多.曲线的横坐标是温度，而纵坐标是荧光信号的变化。开始加热，信号变化不大，所以几乎是平的，接近Tm时，突然变化加大，所以出现峰值.再升温，产物全部解离，就又是一条直线了.如果有非特异性产物，在加热过程中就会出现一些比较矮，宽的峰.
SYBR green PCR溶解曲线有何意义 作用类似于电泳，但是相对于电泳更灵敏，更清晰一些。通过溶解曲线可以了解目的产物TM值，是否出现杂峰。一般溶解曲线的结果+电泳的结果和在一起相对比较准确。当然最后片段也可以测序最终确定目的产物。主要的是：根据溶解曲线可以确定以下几点：a.扩增产物是否单一，即是否含有引物二聚体等其它非目的性产物。如果在90度左右的时候溶解曲线陡然下降，说明产物较纯。b.可以确定产物的Tm值，一般在90度以上。可能用途更多，最常用的主要的两点就是这两个了。针对溶解曲线还有一条相应的曲线，看起来更方便一些。DNA溶解曲线表示扩增产物的特异性。曲线横坐标是温度，每个温度点一个。一般从60到98度纵坐标是荧光强度的变化值（不是强度本身）。一开始加热的时候，虽然荧光强度比较强，但是由于双链没有解离，所以荧光强度保持不变。当加热接近于PCR产物Tm时，双链开始解离，荧光强度变小，机器会比较前后2个温度点的荧光强度，然后把2者的差值标在图上。Tm到达时，有一般双链解离，这时的荧光强度变化最大（峰值）。再加热，双链全部解离，所以荧光强度的变化又变小了。PCR产物大小不一，但是只要有相同或者相近的Tm，峰值就有可能在一个位置上。如果实际测得的峰值。
什么是realtime-PCR溶解曲线 如图所示，这就是bai一个du标准的real time-qPCR溶解曲线。下面zhi从几个方面dao来解读：1、随着专温度的升高，DNA双链断裂；接属着温度降低，到达退火温度的时候，DNA双链复性，荧光分子绑定在DNA双链上，所以荧光信号值到达最高点。上面的是反映在扩增曲线上面的。2、接着DNA双链分子由退火温度约60度，继续升温，双链断开，DNA分子溶解。请注意溶解曲线的纵坐标，表示单位时间内荧光信号的变化量。当扩增产物特异，是单一产物的时候，这个纵坐标峰值所对应的横坐标应该是一致的，即呈现单一的溶解峰，这个时候，在同样的温度下，可以认为是产物相同；如果溶解峰不单一，就意味有非特异性扩增。
