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免疫荧光试验法脱恐 畜禽免疫荧光抗体试验怎么做?

2021-04-09知识7

免疫荧光分析技术(间接法),免疫荧光分析Immuofluorececeaay,IFA是将抗原抗体反应的特异性和敏感性与显微示踪的精确性相结合。以荧光素作为标记物,与已知的抗体或抗原。

畜禽免疫荧光抗体试验怎么做?免疫荧光抗体技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术发展的 基础上建立起来的一项技术,把免疫学的特异性、敏感性和显微镜 技术的精确性?

什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法 免疫荧光2113技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相5261应抗体(或抗原)4102以化学的方法结合,1653将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体-抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知的抗体(或抗原)即可推知另一个未知抗原(或抗体)的存在。1.直接免疫荧光法 直接免疫荧光法是利用荧光色素标记的特异性抗体直接与相应的抗原结合,以鉴定未知抗原。本法具有操作简单、时程短、特异性高的优点,但也 存在缺点如不能检查抗体,敏感性较差。(1)在标本上滴加荧光素标记抗体,放入湿盒中。37℃温育30min。(2)PBS 冲洗后,再用PBS分三缸浸泡,每缸3min。(3)PBS浸泡1~2min,风干。(4)缓冲甘油封片。在荧光显微镜下观察。进行直接免疫荧光法时应注意:①温育时一定要将玻片放在湿盒中,以防液体蒸发。②用PBS浸泡时应不断振荡。2.间接免疫荧光法 间接免疫荧光法以荧光素标记抗球蛋白抗体,抗体与相应抗原结合后,荧光标记的抗球蛋白抗体与已结合的抗体发生作用,从而推知抗原或抗体的 存在。间接荧光技术可以用已知的抗原检测未知的抗体,也可用。

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