叶绿素紫外分光光度法 叶绿素a含量的测定

紫外可见分光光度计的主要组成部件有哪些 紫外可见分光光度计主要由光源、单色器、吸收池、检测62616964757a686964616fe4b893e5b19e31333431346435器和信号显示系统五大部分组成。光源，是提供符合要求的入射光的装置，有热辐射光源和气体放电光源两类；单色器：功能是将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束，它是分光光度计的心脏部分；吸收池：又称比色皿，供盛放试液进行吸光度测量之用，其底及两侧为毛玻璃，另两面为光学透光面，为减少光的反射损失，吸收池的光学面必须完全垂直于光束方向。根据材质可分为玻璃池和石英池两种，前者用于可见光光区测定，后者用于紫外光区；检测器：是将光信号转变为电信号的装置，测量吸光度时，并非直接测量透过吸收池的光强度，而是将光强度转换为电流信号进行测试，这种光电转换器件称为检测器；信号显示系统：是将检测器输出的信号放大，并显示出来的装置。扩展资料在水和废水监测中的应用，对于一个水系的监测分析和综合评价，一般包括水相、固相、生物相。在水质的常规监测中，紫外可见分光光度法占有较大的比重。由于水和废水的成分复杂多变，待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大，在具体分析时必须选择好分析方法。在农产品和食品分析中可用于。分光光度法和比色法有何异同 1、原理不2113同（1）、分光光度法的原理基于朗伯一5261比尔（Lambert-Beer）定律，4102在分光光度计中，将不同波长1653的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法。（2）、比色法的原理是基于被测物质溶液的颜色或加入显色剂后生成的有色溶液的颜色，颜色深度和物质含量成正比，则根据光被有色溶液吸收的强度，即可测定溶液中物质的含量。2、特点不同（1）、分光光度法具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法。（2）、比色法以生成有色化合物的显色反应为基础，针对性强，使用条件较为严格：反应应具有较高的灵敏度和选择性，反应生成的有色化合物的组成恒定且较稳定，它和显色剂的颜色差别较大。3、历史发展不同（1）、比色法的历史比分光光度法悠久。早在公元初古希腊人就曾用五倍子溶液测定醋中的铁，1795年，俄国人也用五倍子的酒精溶液测定矿泉水中的铁。比色法作为一种定量分析的方法，大约开始于19世纪30～40年代。而分光光度法是现代社会普遍使用的一种测定物质含量的方法。（2）、随着光学仪器制造技术的发展，紫外－可见分光光度计应用日益。用分光光度计测定藻液中叶绿素含量为什么会出现负值 被测液的透过率（T值）比参比液大，即参比液调了100%满度后，被测液的T值大于100%叶绿素的紫外-可见吸收光谱 叶绿素含有2种呀，请看下面的叶绿素a在645nm和663nm 处均有吸收，在645nm处吸光系数较小，为16.75，在663nm 处较大，为82.04；叶绿素b 在645nm和663nm 处亦都有吸收，但在645nm处吸光系数较大，为45.60，在663nm 处较小，为9.27。由此可知：叶绿素a的吸收峰值出现在663nm 处，该吸收曲线延伸到645nm处，在此波长处的吸收系数不如在663 nm 处大，因此在计算公式中求算叶绿素a的含量时，需扣除叶绿素b在663nm和645nm 处的吸光度值，再进行计算。标准分析方法要求，叶绿体色素提取液不可浑浊，在710nm或750nm波长下测量吸光度，其值应小于叶绿素a吸收峰的吸光度值的5％，否则应重新过滤。假定样品在663nm处的吸光度值为0.03，则在750nm处的吸光度值不得大于0.0015，对试液的清澈程度要求很高，测量710nm或750nm的目的是避免悬浮物质的干扰，一般测量水中的浑浊度所采用的波长为680nm，为避免在680nm处仍有叶绿素a产生的吸收值，故将测量浑浊度的波长选在710nm以上。在计算公式中，凡参与计算的各吸光度值都应减去710nm处的吸光度值，以扣除悬浮物质的干扰。采用分光光度法测定叶绿素含量，对测量仪器分光光度计的波长精确度要求较高。如果波长与原吸收峰波长相差1nm，。叶绿素a含量的测定 稀释你的待测液，至所测吸光度值在所需范围即可紫外分光光度仪测量叶绿素时吸光度的范围？ 叶绿素a无法使用校准曲线，需用几个波长下的吸光度值，根据经验公式来分别计算出各项指标的含量。因为叶绿体色素由叶绿素a、叶绿素b等物质组成，试液是多组分的混合溶液，。叶绿素的紫外-可见吸收光谱 叶绿素含有2种呀，请看下面的叶绿素a在645nm和663nm 处均有吸收，在645nm处吸光系数较小，为16.75，在663nm 处较大，为82.04；叶绿素b 在645nm和663nm 处亦都有吸收，但在645nm处吸光系数较大，为45.60，在663nm 处较小，为9.27.由此可知：叶绿素a的吸收峰值出现在663nm 处，该吸收曲线延伸到645nm处，在此波长处的吸收系数不如在663 nm 处大，因此在计算公式中求算叶绿素a的含量时，需扣除叶绿素b在663nm和645nm 处的吸光度值，再进行计算.标准分析方法要求，叶绿体色素提取液不可浑浊，在710nm或750nm波长下测量吸光度，其值应小于叶绿素a吸收峰的吸光度值的5％，否则应重新过滤.假定样品在663nm处的吸光度值为0.03，则在750nm处的吸光度值不得大于0.0015，对试液的清澈程度要求很高，测量710nm或750nm的目的是避免悬浮物质的干扰，一般测量水中的浑浊度所采用的波长为680nm，为避免在680nm处仍有叶绿素a产生的吸收值，故将测量浑浊度的波长选在710nm以上.在计算公式中，凡参与计算的各吸光度值都应减去710nm处的吸光度值，以扣除悬浮物质的干扰.采用分光光度法测定叶绿素含量，对测量仪器分光光度计的波长精确度要求较高.如果波长与原吸收峰波长相差1nm，则叶绿素a的测定误差为2％，叶绿素b为19％，。

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