最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:张海强0312实验一植物抗氧化酶活性的测定植物抗氧化酶包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)等。它们普遍存在于植物的各种组织中,可以通过催化植物体内的活性氧,防止发生氧化反应。所以抗氧化酶活性与植物的代谢强度及逆境适应能力有密切关系,经常被用来衡量植物的抗性强弱和衰老程度。一、超氧化物岐化酶活性测定超氧物歧化酶(SOD)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基()的酶,它催化下列反应:2反应产物H2O2可被过氧化氢酶进一步分解或被过氧化物酶利用。因此SOD有保护生物体免受活性氧伤害的能力。已知此酶活力与植物抗逆性及衰老有密切关系,故成为植物逆境生理学的重要研究对象。【原理】本实验依据超氧物歧化酶抑制e68a84e8a2ad7a6431333433623764氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有可氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生,可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲。后者在560nm处有最大吸收,而SOD可清除从而抑制了甲的形成。于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低,反之酶活性愈高。一个酶活性单位。
超氧化物歧化酶活性的测定 去文库,查看完整内容>;内容来自用户:压岁钱揽逝植物组织中超氧化物歧化酶和平测定方法【实验目的】1.了解还原法测定抗氧化酶活性测定的原理方法。2.熟悉植物叶片中ROS去除机制。【实验原理】超氧化物歧化酶(SOD)普遍存在于动植物与微生物体内。SOD是含金属辅基的酶。高等植物有两种类型的SOD:Mn-SOD和Cu/ZnSOD。SOD能够清除超氧阴离子自由基(O2—),它与CAT、POD等酶协同作用来防御活性氧或其他过氧化物自由基对细胞膜系统的伤害,从而减少自由基对机体的毒害。超氧阴离子自由基(O2—)是生物细胞某些生理生化反应常见的中间产物。SOD能通过歧化反应清除生物细胞中的超氧阴离子自由基,生成H2O2和O2。生成的H2O2可被过氧化氢酶分解为O2和H2O:SOD2O2—+2H+CATH2O2+O22H2O2O2+H2O超氧自由基非常不稳定,寿命极短,一般用间接方法测定SOD活性。本实验依据SOD抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性的大小。有氧化物质存在时,核黄素可在光照条件下还原。被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2—。当加入NBT后,在光照条件下O2—又可将NBT还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有最大光吸收。当加入SOD时,SOD可通过清除O2—,而抑制NBT的光。
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