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mtt调零孔测OD值 细胞增殖实验(MTT法)

2021-04-07知识0

MTT实验中的注意事项 在MTT实验中有许多细节是大家常常忽略的,以至于实验结果不如意,以下是一些好的细节归整,大家一起来学习吧!二甲基亚砜 细胞:1.选择适当的细胞接种浓度。。

怎样降低MTT法试验过程中的各种影响因素 测定细菌对细胞的毒性试验最好用ldh还是mtt法⒈选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板e69da5e887aa3231313335323631343130323136353331333431366266的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行mtt试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证mtt结晶形成数量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低,太少观察不到差异。⒉药物浓度的设定。一定要多看文献,参考别人的结果再定个比较大的范围先初筛。根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记!否则,可能你用的时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。⒊时间点的设定。在不同时间点的测定od值,输入excel表,最后得到不同时间点的抑制率变化情况,画出变化的曲线,曲线什么时候变得平坦了(到了平台期)那个时间点应该就是最好的时间点(因为这个时候的细胞增殖抑制表现的最明显)。⒋培养时间。200ul的培养液对于10的4~5次方的增殖期细胞来说,很难维持68h,如果营养不够的话,细胞会由增殖期渐渐趋向g0期而趋于。

细胞增殖实验(MTT法),MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-4,5-dimethylthiahiazo-z-y1-3,5-di-heytetrazoliumromide,MTT(噻唑蓝)为基础。MTT为黄色化合物,是一种接受氢。

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