若高效液相色谱实验中的色谱峰无法分离，应如何改善实验条件？ 要改善的条件很多，介绍几种供参考 1、色谱柱，色谱柱使用时间长了，柱效会降低，会影响到分离度的，改善方法是更换新的色谱柱。如果已经是新的色谱柱了，分离度还不好，那。
色谱柱的性能评价 色谱柱的性能除了与固定相性能有关外，还与填充技术有关。在正常条件下，填料粒度>；20um时，干法填充制备柱较为合适；颗粒时，湿法填充较为理想。百填充方法一般有4种：①高压匀浆法，多用于分析柱和小规模制备柱的填充；②径向加压法，Waters专利；③轴向加压法，主要用于装填大直径柱；④干法。柱填充的技术性很强，大多数实验室使用已填充好的商品柱。必须指出，高效液相色谱柱的获得，装填技术是重要环节，但根度本问题还在于填料本身性能的优劣，以及配套的色专谱仪系统的的结构是否合理。无论是自己装填的还是购买的色谱柱，使用前都要对其性能进行考察，使用期间或放置一段时间后也要重新检查。柱性能指标包括在一定实验条件下（样品、流动相、流速、温度）下的柱压、理论塔板高度和塔板数、对称因子、容量因子和选择性因子的重复性，或分离度。一般说来容量因子和选择性因子的重复性在±5%或±10%以内。进行柱效比较时，还要注意柱外效应是否有变化。一份合格的色谱柱评价报告应给出柱的基本参数，如柱长、内属径、填料的种类、粒度、色谱柱的柱效、不对称度和柱压降等。
提高高效液相色谱柱效的方法 1、选用细颗粒的2113填料，可获得高柱5261效。2、降低流动相流速，4102使得渗透时间变长，1653有利于达到高柱效。3、流动相粘度低，溶质在流动相中的扩散系数大，有利于加快传质，可获得高柱效。4、采用低配比固定液，有利于减小固定相传质阻力，可提高柱效。5、提高温度，可减小流动相和固定相的粘度，增大组分的扩散系数，改善传质，提高柱效。6、组分的扩散系数还取决于组分本身的结构，过大分子的扩散系数小，对获得高柱效不利。扩展资料高效液相色谱法有“四高一广”的特点：①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。③高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。④高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。⑤应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。参考资料来源：-。
