梯度平板稀释法分离纯种微生物的方法和原理是什么 稀释平板计数法原理

稀释平板计数法 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：zyq19850901稀释平板计数操作方法实验原理平板菌636f7079e799bee5baa6e997aee7ad9431333433623766落计数法是将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的2—3或更多个细胞。因此平板菌落计数的结果往往偏低。为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向使用菌落形成单位(cfu)而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。平板菌落计数法虽然操作较繁，结果需要培养一段时间才能取得，而且测定结果易受多种因素的影响，但是，由于该计数方法的最大优点是可以获得活菌的信息，所以被广泛用于生物制品检验（如活菌制剂），以及食品、饮料和水〔包括水源水〕等的含菌指数或污染程度的检测。实验器材LB液体、固体培养基1m1移液器，平皿，试管，试管架，恒温培养箱等。实验步骤1．无菌器材的准备(1)无菌培养皿：取培养皿9。稀释涂布平板法的计数规则 如果只有一个稀2113释度的平均菌5261落数符合30~300这个范围则以该稀释度平均4102菌落数除以涂布1653平板所用稀释液体积(0.1mL)，乘以稀释倍数作为该样品的细菌总数如果有两个稀释度的平均菌落数符合要求则按照两者菌落总数之比来决定如果小于2，取两者的平均值如果大于2，取较小的菌落总数本题的46*10^3与295*10^2的比之为1.6应取两者的平均值（46*10^3+295*10^2)/0.1/2=3.775*10^5梯度平板稀释法分离纯种微生物的方法和原理是什么 首先，将待测样品制成均匀的系列浓度梯度稀释液，（稀释的目的在于：尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞）），再取各个稀释度、同等量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内.经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数.用这种方法计算出的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数.因为稀释的时候并不知道有没有稀释过度，所以要用不同浓度的稀释液分别做实验，最后取琼脂平板上出现单个的菌落时的浓度进行计数，经过计算，得出菌液含菌量.微生物平板菌落计数法具体实验步骤 一、目的要求学习平板菌落计数的基本原理和方法.二、基本原理平板菌落计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的，也就是说一个菌落即代表一个单细胞.计数时，先将待测样品作一系列稀释，再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中，使其均匀分布于平皿中的培养基内，经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可换算出样品中的含菌数.这种计数法的优点是能测出样品中的活菌数.此法常用于某些成品检定(如杀虫菌剂)，生物制品检定以及食品、水源的污染程度的检定等.但平板菌落计数法的手续较繁，而且测定值常受各种因素的影响.三、器材大肠杆菌悬液，牛肉膏蛋白胨培养基，1ml无菌吸管，无菌平皿，盛有4．5 ml无菌水的试管，试管架和记号笔等.四、操作步骤1．编号：取无菌平皿 9套，分别用记号笔标明10-4、10-5、10-6各3套.另取6支盛有4．5ml无菌水的试管，排列于试管架上，依次标明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6.2．稀释用1ml无菌吸管精确地吸取0．5ml大肠杆菌悬液放入10-1的试管中，注意吸管尖端不要碰到液面，以免吹出时，管内液体外溢.然后仍用此吸管将管内悬液来回吸吹三次，吸时伸入管底，吹时离开水面，使其混合均匀.另取一。稀释涂布平板法和平板划线法 平板划线法是用于分离菌落的，稀释涂布平板法是用于计数的.补充：平板划线法分离的同时就是为了纯化.平板划线法为什么不能计数，稀释涂布平板法为什么可以计数和纯化。 平板划线2113法最开始的划线很可能菌类会长5261成一片，导致无4102法计数，此外灼烧接种环接种针1653的时候也会杀死一部分菌类。稀释涂布平板法是稀释一组浓度梯度，在合适的稀释浓度可以确定菌类的密度，通过计算可以得知原液的浓度。因为长成的是一个真菌或者细菌分裂而来互不相接触的菌落 所以可以纯化。把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。通过反复划线分离，可获得微生物的纯种。扩展资料：因为将微生物悬液先加到较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中常用的纯种分离方法是涂布平板法。其做法是先将已熔化的培养基倒入无菌平皿，制成无菌平板，冷却凝固后，将一定量的微生物悬液滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面，经培养后挑取单个菌落。大多数细菌和真菌，用平板法分离通常是满意的，因为它们的大多数种类在固体培养基上长得很好。并不是所有的微生物都能在固体培养基上生长，例如。高中生物 求解血球计数法和稀释涂布平板法的区别 1、代表含义不同：（1）血球计数法：医学上常用来计数红细胞，白细胞等而得名，也常用于计算一些细菌，真菌，酵母等微生物的数量。血球计数板是一种常用的细胞计数工具。（2）稀释涂布平板法：微生物学实验中的一种操作方法。由于将含菌材料现加到还较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，而且采用稀释倒平台法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是涂布平板法。2、使用目的不同：（1）血球计数法：常用来计数红细胞，白细胞等细胞数量。（2）稀释涂布平板法：微生物学研究中更常用的纯种分离方法是涂布平板法，根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。扩展资料涂布平板法的特征：稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的。显微镜计数法，活菌计数法，稀释涂布平板法，平板划线法，血球计数法区别 1、显微镜计数法即血球计数法，事先把菌液稀释到一定的倍数，然后通过血球计数板在显微镜下计数。此法计数比较精准。2、活菌计数法是将待测样品经一系列 10 倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取 0.2ml 放入无菌平皿，再倒入适量的已熔化并冷至 45 ℃ 左右的培养基，与菌液混匀，冷却、待凝固后，放入适宜温度的培养箱或温室培养，长出菌落e69da5e6ba907a686964616f31333431373334后，计数，按下面公式计算出原菌液的含菌数：每毫升原菌液活菌数=同一稀释度三个以上重复平皿菌落平均数×稀释倍数×53、稀释涂布平板法是一种粗略的活菌计数法，即通过一定的稀释倍数，涂布到平板上，在适宜的条件下培养后，观察活菌数。4、平板划线法一般指划线平板，平板划线法是用来分离单菌落的一种方法，不是计数的方法。5、血细胞计数，是用于检测细胞的特征性变量，包括细胞大小、细胞数量、细胞形态和结构、细胞周期、细胞DNA、细胞表面蛋白质和胞质蛋白质的常规检查之一。扩展资料活菌计数法又称间接计数法。活菌计数法是在一定浓度的定量药物内加入定量的试验菌，经过一定时间培养后，取样进行活菌计数。活菌计数是将定量的药物与试验菌作用后的混合液稀释后加入。稀释涂布平板法的计数规则 显微镜计数法即血球计数法，事先把菌copy液稀释到一定的倍数，然后通过血球计数板在显微镜下计数。此法计数比较精准。活菌计数法是将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取0.2ml放入无菌平皿，再倒入适量的已熔知化并冷至45℃左右的培养基，与菌液混匀，冷却、待凝固后，放入适宜温度的培养箱或温室培养，长出菌落后，计数，按下面公式计算出原菌液的含菌数：每毫升原菌液活菌数=同一稀释度三个以上重复平皿菌落平均数×稀释倍数×5稀释涂布平板法是一种粗略的活菌计数法，即通过一定的稀释倍数，涂布到平板上，在适宜的条件下培养后，观察活菌数。平板划线法是用来分离单菌落的一种方法，不是计数的道方法。

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