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跑qpcr内参基因循环数 qPCR 目的基因与内参是不是要在同样体系里扩增

2021-04-07知识3

荧光定量内参跑出来了,但目的基因的cq值却是三十几怎么回事 相对定2113量有两种方法。要求扩增效5261率相同的是ΔΔ4102Ct法,因为只有扩增效率相同目1653的基因与内参基因的Ct值之差才是恒定的值,这是使用这种方法处理数据的前提,所以正式实验之前要进行条件优化,这种方法的优势是不用作标准曲线。如果扩增效率不同就要。

实时荧光定量pcr内参是什么东西 1、实时荧光定量PCR内参:在不同的PCR反应管中已定量的内参和引物,内参用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内参也被扩增。在PCR。

QPCR内参太高,什么原因,怎么解决 我也遇到了类似的问题。提取组织RNA反转录后做Q-PCR,选18S做内参基因。以前做一般都10个循环左右,最近这一批组织却22个循环。溶解曲线也是好的,反转录体系也没有问题(用以往的RNA同时反转录做Q-PCR,18S的CT值还是10左右)。提取RNA好像也没有问题。我是分离了脂肪组织中的成熟脂肪细胞部分,确实不好提RNA,但是浓度也有300ng/ul左右,260/280是1.8-2.0。

#跑qpcr内参基因循环数

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