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调节等电点沉降蛋白质氨基酸 沉淀蛋白质的几种方法及应用实例

2021-04-06知识5

盐析法沉淀蛋白质时,为什么需要将ph值调到等电点附近? 1.你说的现象叫等电点沉淀法.蛋白质是带电荷的,有的带正电,有的带负电,因此蛋白质溶液能够稳定存在地原因之一是由于蛋白质分子或其他溶液中成分因为带相同电荷尔相互排斥,不会凝聚或絮凝.每种蛋白质都有等电点,在此pH值条件下,蛋白质不带电荷.因此破坏了原来蛋白质溶液中由于带电荷互相排斥而稳定溶解的状态.因此,此时的蛋白质溶解度最低,或者不溶解,因而会沉淀.2.而盐析是不同的概念.盐析沉淀蛋白质方法有两种解释(1)盐在水溶解度高于蛋白质,因此有大量盐在水中饱和时,蛋白质被挤出不再溶解,因而沉淀.(2)蛋白质空间结构中有疏水集团和亲水集团,在水中溶解时多数是亲水集团在结构外围.加入硫酸铵等物质后,蛋白质结构发生变化,疏水集团暴露在外面,因而不溶于水而沉淀下来.

等电点的蛋白质沉淀蛋变性了吗 没有。蛋白质在水抄中呈胶体,袭原因有两个:水化膜2113和电荷层。水化膜是5261因为许多蛋白质有4102亲水基团,1653强烈的吸引周围的水分子,形成水化层,从而阻止蛋白质分子的相互凝集。而蛋白质有具有两性,即在溶液中的氨基端和羧基端均可解离。同种电荷的互斥也就保证了蛋白质分子的不凝集。如果将蛋白质溶液的pH值调至等电点,则可以使蛋白质分子不再带电,从而破坏电荷层,使其凝聚沉降。而此时,蛋白质的基本结构并没有改变。所以等电点沉降出来的蛋白质没有变性。

蛋白质有哪些理化性质? 蛋白质是由氨基酸组成的大分子化合物,其理化性质一部分与氨基酸相似,如两性电离、等电点、呈色反应、成盐反应等,也有一部分又不同于氨基酸,如高分子量、胶体性、变性等。

#调节等电点沉降蛋白质氨基酸

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