结核分枝杆菌的微生物学检查程序 标本 标本的选择根据感染部位。可取痰、支气管灌洗液、尿、粪、脑脊液或胸、腹水。其他肺外感染可取血或相应部位分泌液或组织细胞。直接涂片镜检 标本直接涂片或集菌后涂片,用抗酸染色。若找到抗酸阳性菌即可初步诊断。抗酸染色一般用ziehl-neelsen法。为加强染色,可用ik(intensified kinyoun)法染色。将石炭酸复红染色过夜,用0.5%盐酸乙醇脱色30s,则包括大多结核分枝杆菌l型也可着色。为提高镜检敏感性,也可用金胺染色,在荧光显微镜下结核分枝杆菌呈显金黄色荧光。浓缩集菌 先集菌后检查,可提高检出率。培养与动物试验也必须经集菌过程以除去杂菌。脑脊液和胸、腹水无杂菌,可直接离心沉淀集菌。痰、支气管灌洗液、尿、粪等污染标本需经4%naoh(痰和碱的比例为1:4,尿、支气管灌洗液和碱的比例为1:1)处理15min,时间过长易使结核分枝杆菌l型与非结核分枝杆菌死亡。尿标本先加5%鞣酸、5%乙酸各0.5ml于锥形量筒内静置,取沉淀物处理。处理后的材料再离心沉淀。取沉淀物作涂片染色镜检。若需进一步作培养或动物接种,应先用酸中和后再离心沉淀。分离培养 将经中和集菌材料接种于固体培养基,器皿口加橡皮塞于37℃培养,每周观察1次。结核分枝杆菌生长缓慢,一般。常用微生物染色的方法 革兰染色抗酸染色:分支杆菌属,诺卡放线菌属。石炭酸复红染色,金永染色。芽孢染色:用于区分细菌的芽孢和营养细胞。结果芽孢染成绿色,营养细胞为红色。晶体染色:观察苏云金杆菌不同变种的晶体形状大小。结果晶体染成紫色,芽孢为透明椭圆形,仅见具有轮廓的折光体。鞭毛染色:有赖夫生染色法、银盐染色法,西萨-基尔染色法等。一般以西萨-基尔(Cesares-Gill)染法效果最佳。异染颗粒染色:用于白喉棒状杆菌染色,直接涂片或改良阿伯特法染色。墨汁荚膜染色:观察菌体有无荚膜,如新型隐球菌。碳素墨汁。镀银染色:螺旋体吉姆萨染色:螺旋体荧光染色魏申染色(wayson)染色:鼠疫耶尔森杆菌。铬酸P、A、S真菌类染色。结果:曲霉菌、念球菌属、细胞浆菌属、隐球菌属为红紫色。曲霉菌丝周边紫红色,弹力纤维紫色,背景绿色。Mann氏甲基蓝伊红染色法:病毒包涵体染色。Negri氏小体红色。Nacchiavello氏染色:病毒包涵体染色。结果:包涵体、立克次氏体均染红色,其余组织呈蓝色。Crocott-Gomori氏六胺银法:新型隐球菌碘染色法吉姆萨染色:衣原体乳酸酚棉蓝染色,糖原染色:真菌,前者适用于所有真菌,呈蓝色。吉姆萨染色,瑞氏染色:鞭毛虫,滴虫,锥虫,疟原虫,弓形虫,隐孢子虫等原虫。三色染色,碘。我三次涂片未找到抗酸杆菌,这是什么意思 诊断2113结核,痰涂片抗酸染色是十5261分重要的检查项目,如果能查到抗酸杆菌几乎4102就可以1653确立结核的诊断。但单次痰涂片抗酸染色阳性率不高,一般要求至少采集三份痰标本,并连续送检三天(三次)。如果三次都没有发现抗酸杆菌,虽然不能完全排除结核,但至少结核的可能性已经不大了
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