细胞周期同步化 1．振荡收集法该法利用M期细胞变圆易脱落的特点，将生长旺盛的贴壁细胞按一定的时间间隔振荡，使M期细胞脱落，逐步收集培养基，并补充新的培养基。收集的细胞放4~E冰箱中保存，离心沉淀后即获得M期细胞。2．秋水仙胺阻抑法(1)将细胞传代培养至指数生长期。(2)加入秋水仙胺，使最终浓度为0．05—0．1μg/mL培养基，作用6—7 h。如使用秋水仙素，使用浓度应加大5～10倍。(3)荡收集细胞，800 r/min离心5—10 min，弃上清，收集的沉淀细胞即为M期细胞。加入一定量培养基将细胞接种到培养瓶中或直接进行离体实验。由于秋水仙素或秋水仙胺对细胞有一定毒性，用量较小或作用时间较短细胞活性尚可恢复，而用量过大或时间过长则细胞不能存活，因此使用时应严格控制其剂量和作用时间。3．N2阻断法 此方法较秋水仙胺阻抑法好。(1)将细胞传代培养至指数生长期。(2)将培养瓶置于N20罐中通人适量CO2(约相当于罐中体积的5%)。(3)关闭好N2罐，接上N2管子及压力表，缓缓向罐中充气一直到压力为80-90磅/英寸2为止。(4)将N2装置放在37℃培养箱中10—16 h(通常过夜)。次日从培养箱中取出，然后缓缓将N2放出(最好放出窗外)。(5)取出细胞在镜下观察同步化效果，用振荡法收集细胞于离心管中。(6)800。
秋水仙素能否作用于动物细胞？ 秋水仙素作用于分bai裂中后期du，原理是抑制纺锤体的生成zhi，并dao抑制着丝点的分裂。版在减二前期运用多倍体诱权导的方法得到结果不过是获得类似减一完成后所形成的细胞，因为我们可以注意到减二是没有遗传物质的复制的，并不能达到类似正常细胞染色体加倍的效果。希望对你有帮助。
细胞同步化的M期同步化 (一)M期同步化方法1．振荡收集法该法利用M期细胞变圆易脱落的特点，将生长旺盛的贴壁细胞按一定的时间间隔振荡，使M期细胞脱落，逐步收集培养基，并补充新的培养基。收集的细胞放4~E冰箱中保存，离心沉淀后即获得M期细胞。2．秋水仙胺阻抑法(1)将细胞传代培养至指数生长期。(2)加入秋水仙胺，使最终浓度为0．05—0．1μg/mL培养基，作用6—7 h。如使用秋水仙素，使用浓度应加大5～10倍。(3)荡收集细胞，800 r/min离心5—10 min，弃上清，收集的沉淀细胞即为M期细胞。加入一定量培养基将细胞接种到培养瓶中或直接进行离体实验。由于秋水仙素或秋水仙胺对细胞有一定毒性，用量较小或作用时间较短细胞活性尚可恢复，而用量过大或时间过长则细胞不能存活，因此使用时应严格控制其剂量和作用时间。3．N2阻断法 此方法较秋水仙胺阻抑法好。(1)将细胞传代培养至指数生长期。(2)将培养瓶置于N20罐中通人适量CO2(约相当于罐中体积的5%)。(3)关闭好N2罐，接上N2管子及压力表，缓缓向罐中充气一直到压力为80-90磅/英寸2为止。(4)将N2装置放在37℃培养箱中10—16 h(通常过夜)。次日从培养箱中取出，然后缓缓将N2放出(最好放出窗外)。(5)取出细胞在镜下观察同步化效果，用振荡法收集细胞。
