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RNA的提取方法步骤及原理. 动物组织RNA保护液

2021-04-06知识4

RNA的测序原理及方法!^~^ 细胞中的RNA可以分为信使RNA、转运RNA和核糖体RNA三大类,不同组织总RNA提取的实质就是将细胞裂解,释放出RNA,并通过不同方式去除蛋白,DNA等杂质,最终获得高纯度RNA产物。

种子是由子房发育来的,还是胚珠发育来的 1、胚珠发育成种子;受精卵发育成胚;子房发育成果实;珠被发育成种皮;子房壁发育成果皮。2、果实是被子植物独有的繁殖器官,一般是由受精后雌蕊的子房发育形成的特殊结构。

RNA的提取方法 1、酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯萃取,高速离心后取上清,所得DNA大小为100-150kb2、甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。3、玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。4、异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)5、表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。6、加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。7、碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。扩展资料:DNA提取原则:1、保证核酸一级结构的完整性;2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;4、其他核酸分子,如RNA,也应尽量去除。参考资料来源:—DNA提取

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