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纸层析试验现象 纸层析实验的详细内容及用途

2021-04-06知识4

生物 A.未见色素带,说明材料为黄化叶片:黄化叶片也有色素带如叶黄素。B.色素始终在滤纸上,是因为色素不溶于层析液:色素溶于层析液,并随其扩散。C.提取液呈绿色是由于。

纸层析实验的实验步骤及现象 氨基酸的纸层析 一、实验目的 1.了解并掌握氨基酸纸层析的原理和方法.2.学习纸层析法的操作技术,分析未知样品氨基酸的成分.二、实验原理 用滤纸为支持物进行层析的方法,称为纸层析法,它是分配层析法的一种.纸层析所用的展层溶剂大多是由水饱和的有机溶剂组成.滤纸纤维的—OH 基的亲水性基团,可吸附有机溶剂中的水作为固定相,有机溶剂作为流动相,它沿滤纸自下向上移动,称为上行层析;反之,使有机溶剂自上而下移动,称为下行层析.将样品点在滤纸上进行展层,样品中的各种氨基酸即在二相中不断进行分配,由于它们各自的分配系数不同,故在流动相中移动速率不等,从而使不同的氨基酸得到分离和提纯.纸层析法主要是依据混合组分对二相分配系数的差异进行分离,但亦存在着某种程度的吸附作用和离子交换现象.氨基酸经层析在滤纸上形成距原点不等的层析点,氨基酸在滤纸上的移动速率用Rf 表示.Rf=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离 只要实验条件(如温度、展层溶剂的组分、pH、滤纸的质量等)不变,Rf 值是常数,因此可做定性分析参考.如果溶质中氨基酸组分较多或其中某些组分的Rf 值相同或近似,用单向层析不宜将它们分开,为此可进行双向层析,在第一溶剂展开后将滤纸转动90度,以第一。

氨基酸纸层析实验中为了避免实验结果出现拖尾现象,实验操作中应注意哪些 答:氨基酸纸层析实验中为了避免实验结果出现拖尾现象,实验操作中应注意:①层析滤纸要质地均匀,平整无折痕,厚薄适当,溶剂能匀速展开;②点样时尽量将它们点在同一个点。

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