分光光度法的原理是什么? 紫外-可见分光光度法:是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长(频率小)的光线能量小,波长短(频率大)的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。紫外可见分光光度法谁知道原理 1.基本原理单色光辐射2113穿过被测物5261质溶液时,被该4102物质吸收的量与该物质的浓1653度和液层的厚度(光路长度)成正比,即朗伯-比尔定律,这是吸收光谱法定量的理论依据,其关系式如式 3-1:A=ECL 式(3-1)式中 A 为吸收度;E 为吸收系数,即单位浓度、单位液层厚度的吸收度数值;C 为溶液浓度;L 为液层厚度。紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长为 200~760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立的光谱分析方法。《中国药典》(2005 年版)有 10 种药材用该法进行药材的有效性评价。其主要特点为:灵敏度高,可达 10-4 g/ml~10-7 g/ml;准确度高,相对误差为 2%~5%。中药中有紫外吸收的成分或本身有颜色的成分,在一定的浓度范围内,其溶液的吸收度与浓度符合朗伯-比尔定律,均可用此法进行分析。本法适于大类成分的含量测定,如总黄酮、总蒽醌、总生物碱等。2.定量测定法测定时,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用 1cm 的石英吸收池,在选(规)定的吸收峰波长±2nm 以内测试几个点的吸光度,或由仪器在选定波长附近自动扫描测定,以吸光度最大的波长作为测定波长。一般供试品溶液的吸光度读数,以在 0.3~0.7 之间的误差较小。当溶液的 。紫外可见分光光度计的主要操作原理是什么? 透明液体的颜色由所吸收(透过)的光的波长和吸收量的不同而显示不同的颜色和深度,通过检测一定厚度该溶液的吸收波长和吸收量,可以判断溶液中电解质的种类和浓度。紫外可见分光光度计可以在可见光和紫外光光谱之间工作,发射器定强度、定波长发射出的光线在通过等厚度的玻璃皿后,接收器所接收到的强度会有所减弱,通过计算减弱的比例,可以判定溶液的浓度;而通过连续波谱吸收扫描可以大致判断玻璃皿中的溶液的最大特征吸收波长,从而大致判断溶液中可能含有的物质的特征。紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。2、所用的灯不同:(1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常采用钨灯或卤钨灯。3、原理不同:(1)紫外分光光度计根据物质的吸收光谱研究物质的成分,是结构和物质间相互作用的有效手段。(2)可见分光光度计采用低杂散光,高分辨率的单光束单色器,保证了波长准确度、波长重复性和更高的分辨率。扩展资料紫外分光光度计的工作原理:物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同。因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。又因为许多物质在紫外-可见光区有特征吸收峰,所以可用紫外分光。
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