求问如何精确测定死时间和死体积？ 一般情况下在流动相中不保留的成分，出来的第一个峰就是死时间。因此，死体积=死时间X流量。死时间(t0)是液相色32313133353236313431303231363533e58685e5aeb931333332636336谱中的重要参数，其值的精确测定对分离条件的优化和色谱热力学研究具有重要意义。在反相色谱中．固定相极性较弱．流动相一般为强极性的水、甲醇、乙腈等．故通常采用极性更强的NaNO3或NH4No3作为标记物，进行死时间的测定。但由于标记物与固定相之间，存在着一定的相互作用．因此测定结果会与真实死时间有一定的偏离。通常以NaNO3等强极性溶质进行反相液相色谱中死时间测定时，其与固定相之问极弱的相互作用可以忽略不计。这种方法得到的死时间可以进一步用于色谱保留机理的热力学研究和分离条件的优化。高效液相色谱中死时间是个非常重要的基础参数。在进行色谱条件优化及定性鉴定时都需要用到。液相色谱中的基本理论与气相色谱相同，但液相色谱系统与气相色谱系统却有很大差别 如液体的扩散系数和料颗粒的孔体积，也包括填料颗粒间的孔隙体积．故影响死时间的因素也比气相色谱复杂得多。在色谱中测定死时间通常有两种方法，一是用所谓的无保留的探测物如脲嘧啶、D2O、某些无机盐等直接测定。
高效液相出峰有前沿峰是怎么回事？如何消除前沿峰？回答的越详细越好。 前沿峰 1柱温低2样品溶剂使用不当－当样品溶剂的洗脱能力大大强于流动相时会出现前沿峰。例如，在反相色谱中用已腈做样品溶剂，而流动相的洗脱力较弱时会出现前沿峰。3柱。
高效液相色谱仪做实验为何出峰时间不断提前？ 原因分析：1.你的流动相中有三乙胺或二乙胺等扫尾剂，应控制扫尾剂的用量，不要过量，严格按照标准方法配制.2.含有扫尾剂的流动相平衡时间本身就很长，不建议每天都清洗色谱系统，可以采用在不工作的时候将废液管接回流动相瓶中低流量连续平衡色谱系统，减少每次工作的流动相平衡时间.3.环境温度的影响也较大，应当使用柱温箱.4.如果使用的是视差折光检测器，不但要使用柱温箱，连室温也要控制，避免人员在实验室频繁走动导致的温度变化.5.你的检测器是否有温度控制，如果有建议与色谱柱采用相同的温度.
