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氨基酸纸层析试验 纸上层析的“纸上层析”演示实验

2021-04-05知识5

用于体液中氨基酸定量测定的方法有() A.纸层析法 B.Guthrie微生物试验 参考答案:A,B,C

为什么不同氨基酸通过层析可以被分开,影响比移的因素有哪些? 纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法,其中滤纸纤维素上吸附的水是固定相,展层用的有机溶溶剂是流动相。在层析时,将样品点在距滤纸一端约2~3cm的某一处,该点称为原点;然后在密闭容器中层析溶剂沿滤纸的一个方向进行展层,这样混合氨基酸在两相中不断分配,由于分配系数(Kd)不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上。物质被分离后在纸层析图谱上的位置可用比移值(rate of flow,Rf)来表示。所谓Rf,是指在纸层析中,从原点至氨基酸停留点(又称为层析点)中心的距离(X)与原点至溶剂前沿的距离(Y)的比值:在一定条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、温度、湿度、层析滤纸的型号和质量等因素有关。

展开剂的液面高出层析纸的斑点, 后果很严重…将会导致无法分离色谱:因为混合氨基酸将会在展开剂中溶解,然后融在液体中,然后的然后就是表面一片空白…祝你好运~

#氨基酸纸层析试验

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