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丙酮沉淀的蛋白不溶 用丙酮沉淀蛋白时,为何要调pH4.5~5.0?

2021-04-05知识2

SOS,急,请问丙酮沉淀法具体怎么做 1、在21134度下,1:1或相应比例向蛋白质中5261加入丙酮4102(一般用20%-50%的丙酮沉淀1653蛋白),在专冰域中温和的搅拌属10-15分钟;2、低温10000g离心10分钟,除去上清液,用以沉淀体积的2倍体积的冷缓冲液悬浮。丙酮沉淀应该注意的是:1、此过程容易使蛋白质变性,所以有很多情况下复溶的时候会出现沉淀不溶的现象;2、为了最小程度的避免蛋白变性,全部操作必须在冰域上进行,整个过程要操作迅速,缩短丙酮与蛋白的接触时间;3、溶液中如果有高浓度盐,会影响沉淀,离子强度不能超过0.2M。

丙酮沉淀法制取细胞蛋白的原理,谢谢 由于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂加入水中使容积介电常数降低,增加了相反电荷的吸引力,另一方面因为这些有机溶剂是强亲水试剂,争夺蛋白质分子表面的水化水,破坏蛋白质。

用丙酮沉淀蛋白时,为什么温度是控制在0-4摄氏度? 防止蛋白降解,或者在0-4度时蛋白在丙酮中溶解度最低

#丙酮沉淀的蛋白不溶

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