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高效液相色谱中,为什么要对流动相脱气 高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤,脱气

2020-07-25知识11

高效液相色谱中,为什么要对流动相脱气 脱气方式:在线脱气机脱气,前期流动超声波超声脱气;系统中气泡的产生:流动相本身存在,梯度淋洗混合后放出气泡;气泡的影响:存在于管路中,系统压力不稳定,实验结果有偏差;存在于单向阀中,易造成液体回流,流量不准确,甚至是不吸液;存在于检测器中,出现鬼峰,影响检测准确性。所以做液相对流动相的气泡和杂质要求比较严格。用作高效液相色谱流动相的溶剂使用前为什么要脱气? 不脱气的流动相在系统内可能会聚集成气泡,小的气泡会形成气泡峰;大的气泡可能会引起泵空腔,造成压力和流速不稳;气泡在经过柱时还会造成柱干燥,严重的可能会损坏色谱柱。用作高效液相色谱流动相的溶剂使用前为什么要脱气? 不脱气的流动相在系统内可能会聚集成气泡,小的气泡会形成气泡峰;大的气泡可能会引起泵空腔,造成压力和流速不稳;气泡在经过柱时还会造成柱干燥,严重的可能会损坏色谱柱.高效液相色谱法使用流动相前为什么要脱气?方法有哪些? HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。(噪声增大,基线不稳,突然跳动)。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果带来误差。常用的脱气方法有:加热煮沸、抽真空、超声、吹氦等。为什么高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤,脱气 用于高效液相色谱的流动相必须事先除气,否则容易在系统中逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响色谱柱的分离效率、检测器的灵敏度、基线的稳定性,甚至使其无法检测。噪音增加,基线不稳定,突然跳跃。此外,溶解在流动相中的氧可以与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)发生反应。溶解气体也会引起溶剂ph值的变化,从而导致分离或分析结果的误差。常用的除气方法有加热沸腾、抽真空、超声波、吹氦等。高效液相色谱(hplc)是色谱的一个重要分支。以液体为流动相,高压输液系统,将不同极性的单溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入固定相色谱柱。分离柱中的组分后,用检测器检测。实现了样品的分析。扩展资料:液相色谱-质谱联用(LC-MS)可增加额外的分析能力,准确识别和量化细胞和组织裂解物、血液、血浆、尿液和口服液等复杂样品基质中的微量化合物。流动相和固定相都是液体。流动相与固定相应不相容(极性不同,避免固定液流失),界面清晰。当样品进入色谱柱时,溶质分布在两相之间。达到平衡后,遵循高效液相色谱的计算公式。公式中cs溶质在固定相的浓度、cm溶质在流动相的浓度、vs固定相的体积和vm流动相的体积。llpc与gpc有相似之处,即分离。液相色谱使用前为什么要过滤和脱气 一般流动相在上仪器前必须经过两个步骤:减压抽滤和超声减压抽滤有两个目的,一个是过滤掉气体,尤其是有机相和水相混合的时候,会产生大量的气泡。这些气泡进入仪器就会堵住仪器和色谱柱,所以要除掉。一个是过滤掉不溶性微粒。你看一般的过滤膜是4.5um孔径的,这个是针对你的色谱柱而定的。色谱柱一般是5um的粒径,保证过滤的流动相里面小的毛絮啊,颗粒啊都不会进入色谱柱。超声的主要目的也是为了脱气,另外还有助溶和令溶液混合均匀等作用。不过超声主要是为了去掉溶剂瓶瓶壁和瓶底的气泡,所以没必要超声太久的时间,3-5min足够了。总而言之,都是为了保护仪器和色谱柱,防止气泡和杂质进入。高效液相色谱仪流动相为什么要预先脱气 输液量能够均匀准确,压力波动小;保留时间及色谱峰面积重现性会更好;气泡会在谱图中出现尖峰;基线稳定;保护色谱柱,防止填料氧化;减少死体积高效液相色谱法流动相在使用前需要过滤与脱气,常用脱气方法有 真空脱气及在线脱气。 液相色谱流动相脱气使用较多的方法大概有四种:氦气脱气、真空脱气、超声波脱气、加热脱气。1.氦气脱气:氦气脱气是很有效的脱气方法。氦气缓缓的通过流动相赶去溶入的空气,如果使用得当,在10min内可除去80%~90%的溶入气体。由于氦气在流动相中的溶解度极低,所以用氦气脱气保护的流动相可以认为是一个无气体溶解体系。其缺点是氦气价格比较昂贵,会增加检验成本。2.真空脱气:也是比较常用的脱气方法。现在多数企业都最常用这种办法,贮液器被抽成部分真空,溶入的气体蒸发形成气泡溢出,其效果仅次于氦气脱气。象Agileng1200液相色谱使用的是在线脱气机。在线脱气只适合脱完气之后的流动相,在使用过程中的微量脱气。3.超声波脱气:将配制好的流动相连容器放入超声水槽中脱气10-20min。这种方法比较简便,又基本上能满足日常分析操作的要求,所以,目前仍广泛采用。这种方法只能除去30%的溶解气体,有时还会引起气体溶解度的增加。对氧敏感的检测器不宜用此法。4.加热回流脱气:该方法虽然效果很好,但是适用范围较窄。对于有机溶剂或混合流动相不适合用此法,因为挥发性组分会损失掉,改变流动相的组成。综合来说,用真空抽滤后,再用超声脱气还是最常用的办法。使用高效液相色谱时为什么要脱气 你指的是流动相脱气,还是仪器排气?两者的主要目的是一样的,都是为了防止气泡进入仪器。泵如果进了气泡,可能会堵塞,进而仪器瘫痪。色谱柱也会堵住导致报废。。流动相在使用前为什么要过滤和脱气? 过滤是为了除去流动相中的杂质,保护系统和柱子.脱气是为了除去溶解在流动相中得气泡,降低基线噪音.

#色谱#高效液相色谱#空气对流

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