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pcR扩增中第几轮能获得目的基因,为什么?主要分析过程!!要详细!!!急!!!! pcr中为什么要跑循环

2021-04-04知识0

PCR循环数过多会有哪些后果 PCR循环次数通常就是211330左右。循环数太5261多了,虽然在一定程度4102上能够提高产物量,但是由于反应时间过1653长,有一些非特异产物的扩增也会相应增加;而且随着酶的扩增能力下降,合成目标片段的能力也会随之下降,也可能引起其他的非特异性扩增。我们实验室一直用的是诺唯赞的酶,循环数一般就设为30-35度,有时候模板浓度比较低,可能循环数会设的多一些。希望对你有帮助。

大家的PCR一般都跑多少个循环啊 我觉得国外杂志上说要跑50个循环是有可能的。但我们一般也就25-35个循环,我们实验室有人跑过40个循环的,但是那种是所谓touch down 的方法。具体要跑多少个循环,我认为有以下几个因素可以决定:最关键的是引物设计的优劣,这几乎直接决定了实验的结果;其次是要扩增的PCR产物的长度和GC含量了,长度越长,当然圈数要相应增加了,GC含量高些,相应就难扩一点;还有就是TAQ酶量和引物浓度了,浓度大些,相应的圈数可能就要少些,但我试过,浓度过大会抑制反应;此外我觉得模板的种类和质量还有一定关系,不同物种因为GC含量有所区别所以扩增效率也会有所差别。最后,我最喜欢用PE9600了,我几乎从未在它上面失过手,比PRE9700还好用,真不愧为\"PCR至尊

PCR循环次数是否越多越好?为什么 PCR循环次数通常就是30左右2113。循环数太多了,虽然可5261以一定程度的提高产物4102量,但是由于反应时间过长,有一些非特异产1653物的扩增也会相应增加,而且随着酶的扩增能力下降,合成目标片段的能力也会随之下降,也可能引起其他的非特异扩增。dNTP也会消耗,如果有某一种dNTP消耗比较大,后续扩增就难免会引起错配。所以如果产物已经足够用于后续分析,一般都不太会过度延长循环次数的。

#pcr中为什么要跑循环

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