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细胞在接种在24孔板上时,孔的周围细胞密集,中间细胞稀少,怎样操作才能使细胞分布均匀? 培养板接种密度

2021-04-04知识4

25平方厘米的培养瓶能长满多少细胞 25平方厘米的培养瓶约可收获细胞5乘10的6次方,75平方厘米的培养瓶约可收获细胞2乘10的7次方.铺6孔板得看你得接种密度和铺几块板.如接种密度为每毫升10的5次方,每孔加2毫升,一个25平方厘米的培养瓶可铺4块6孔板.

常用的细胞克隆化方法有哪些 克隆化培养方法1.有限稀释法克隆培养通过有限稀释,使细胞密度低至一定程度再接种培养在适宜于单细胞生长的培养液中,形成单独的细胞克隆。细胞克隆是指1个细胞来源.经过细胞分裂形成独立的细胞集落。此法进行的克隆化培养,建议使用平底96孔细胞培养板。接种密度控制在10~200个/ml。在计数准确,细胞活性正常的情况下,一般稀释为20个/ml,每孔接种200μl,这样每孔落人细胞数平均为1,获得单克隆生长孔的概率最大,数量最多。有些细胞的克隆化培养效果不理想的原因与它们在低密度下没有能力生存有关。要使细胞在克隆化培养环境下低密度目标细胞能正常生存,可以模拟高细胞密度的环境,就是让目标细胞在含饲养细胞的培养体系中培养。饲养细胞是一类不能连续分裂的细胞,或者说是一类不能长期存活的细胞,一般存活不超过1~2周。在小鼠杂交瘤细胞做克隆化培养时,通常建议使用健康小鼠的腹腔细胞做饲养细胞,使用时,调整饲养细胞在培养体系中的密度为2~4×104个/ml。另外,也有使用小鼠肾细胞做饲养细胞的例子。2.琼脂中的克隆化培养在铺有底层琼脂的培养孔中进行,由于琼脂凝胶的稳定性使得子代细胞不容易脱落细胞集落。温度高时琼脂呈液态,37℃时成凝胶。

如何将细胞接种到六合板 从培养瓶往板子上种细胞有时的确是需要一些经验和技巧的,因为不同的细胞在瓶子里长的数量是不一样的,我种的是平滑肌细胞,铺的很开,个头又大,。

#培养板接种密度

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