抗酸染色法的抗酸染色一般步骤 用碱性美兰溶液复染1分钟,水洗,用吸水纸吸干后用油镜观察。试述革兰染色法的步骤,结果及其临床意义 一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:1)涂片固定.2)草酸铵结晶紫染1分钟.3)自来水冲洗.4)加碘液覆盖涂面染约1分钟.5)水洗,用吸水纸吸去水分.6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分.7)蕃红染色液(稀)染1分钟后,自来水冲洗.干燥,镜检.具体试验 流程1、取载玻片用纱布擦干,载玻片的一面用marker笔画一个小圈(用来大致确定菌液滴的位置).涂菌的部位在火焰上烤一下,除去油脂.2、涂片:液体培养基:左手持菌液试管,在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌,等冷却后从试管中沾取菌液一环,在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌.固体培养基:先在载玻片上滴一滴无菌水,再用接种环取少量菌体,涂在载玻片上,使其薄而均匀.3、晾干:让涂片在空气中自然干燥.4、固定:让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜).5、染色:将固定过的涂片放报纸上,滴加草酸铵结晶紫液,染1min.6、水洗:用水缓慢冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干.简单染色结束可观察细胞形态.7、媒染:滴加1滴碘液,染1min,水洗.8、脱色:吸去残留水,连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色,立即水洗.9。鞭毛染色原理及注意事项有哪些 鞭毛染色原理鞭毛是细菌的运动“器官”,在普通光学显微镜的分辨力限度以外,故需要用特殊的鞭毛染色法,才能看到。在显微镜下观察细菌的运动性,也可以初步判断细菌是否有鞭毛。通常使用压滴法或悬滴法观察细菌的运动性。观察时,要适当减弱光线,增加反差,如果光线很强,细菌和周围的液体就难以辨别。鞭毛染色是借媒染剂和染色剂的沉淀作用,染色前先用媒染剂(如单宁酸或明矾钾)处理,让它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后再进行染色(如碱性复红、硝酸银、结晶紫)。常用的媒染剂由丹宁酸和氯化高铁或钾明矾等配制而成。目前,细菌鞭毛染色方法根据染色剂的不同,可分为碱性复红法、副品红法、结晶紫法、维多利亚蓝B法、镀银染色法和荧光蛋白染色法6类,前5类方法的媒染剂成分中均含有单宁酸。鞭毛染色方法1.碱性复红法和副品红法:1926年由Gray首创,其媒染液成分包括20%丹宁酸水溶液2.0ml,硫酸钾铝饱和水溶液5ml,饱和氯化汞水溶液2ml,3%碱性复红乙醇(95%)溶液0.4ml,临用前混合,且需过滤后方可使用。染片时,媒染剂染色约6min,具体时间尚需在试验中摸索确定,染色液是抗酸染色Ziehl-Neelsen石碳酸复红染液,染片时需要1小片吸水纸盖在涂片上,。
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