求问如何精确测定死时间和死体积？ 一般情况下在流动相中不保留的成分，出来的第一个峰就是死时间。因此，死体积=死时间X流量。死时间(t0)是液相色32313133353236313431303231363533e58685e5aeb931333332636336谱中的重要参数，其值的精确测定对分离条件的优化和色谱热力学研究具有重要意义。在反相色谱中．固定相极性较弱．流动相一般为强极性的水、甲醇、乙腈等．故通常采用极性更强的NaNO3或NH4No3作为标记物，进行死时间的测定。但由于标记物与固定相之间，存在着一定的相互作用．因此测定结果会与真实死时间有一定的偏离。通常以NaNO3等强极性溶质进行反相液相色谱中死时间测定时，其与固定相之问极弱的相互作用可以忽略不计。这种方法得到的死时间可以进一步用于色谱保留机理的热力学研究和分离条件的优化。高效液相色谱中死时间是个非常重要的基础参数。在进行色谱条件优化及定性鉴定时都需要用到。液相色谱中的基本理论与气相色谱相同，但液相色谱系统与气相色谱系统却有很大差别 如液体的扩散系数和料颗粒的孔体积，也包括填料颗粒间的孔隙体积．故影响死时间的因素也比气相色谱复杂得多。在色谱中测定死时间通常有两种方法，一是用所谓的无保留的探测物如脲嘧啶、D2O、某些无机盐等直接测定。
高效液相色谱中的持留时间是什么意思？ 保留时间：是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间，不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间，因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一.保留时间由物质在色谱中的分配系数决定：Rt=t0(1+KVs/Vm)式中Rt表示某物质的保留时间，t0是色谱系统的死时间，即流动相进入色谱柱到流出色谱柱的时间，这个时间由色谱柱的孔隙、流动相的流速等因素决定.K为分配系数，Vs，Vm表示固定相和流动相的体积.这个公式又叫做色谱过程方程，是色谱学最基本的公式之一.
高效液相色谱中能否用保留时间定性？ 可以的bai，首先进一阵已知对du照品溶液的标样，然后zhi进一针被测样dao品的版溶液，看被测样品溶液色谱权图中在对照品溶液色谱图主峰保留时间处是否有峰，可以鉴别被测样品中是否含有对照品的成分。利用液相色谱法的保留时间进行定性，只是定性鉴别的一种手段，要想得到跟进一步的定性，最好还要辅助其他的鉴别手段。
